ATP合酶F-,0-復(fù)合體c亞基基因在小鼠早期妊娠子宮中的表達與調(diào)節(jié).pdf

1、胚胎著床是一個復(fù)雜的過程，需要活化的胚泡與進入接受態(tài)的子宮內(nèi)膜之間建立聯(lián)系。在嚙齒類動物，著床過程啟動后，子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞發(fā)生廣泛的蛻膜化，為接下來的胚胎及胎盤發(fā)育做準備。近年來隨著基因芯片技術(shù)的迅速發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)了許多與著床以及蛻膜化等相關(guān)的基因，但關(guān)于著床的分子機理仍然不清楚。ATP合酶F0復(fù)合體c亞基(ATPsynthase，H+transporting，mitochondrialF0complex，subunitc，Atp5g)

2、是線粒體功能的重要組成部分，該亞單位由三個核基因共同編碼，分別是ATP合酶F0復(fù)合體c亞基1(Atp5g1)、Atp5g2和Atp5g3。我們實驗室利用基因芯片發(fā)現(xiàn)，與非著床位點相比，Atp5g3基因在小鼠的著床位點顯著上調(diào)。本實驗利用原位雜交檢測了ATP合酶F0復(fù)合體c亞基的三個基因(Atp5g1、Atp5g2和Atp5g3)在圍著床期小鼠子宮中的表達，并利用假孕、延遲著床及激素處理等模型，研究了這些基因在子宮中的表達與調(diào)節(jié)，同時通過

3、構(gòu)建啟動子活性報告載體，研究了雌激素對Atp5g3基因表達的調(diào)節(jié)。 在小鼠妊娠第5天子宮的著床位點、第7-8天的次級蛻膜區(qū)及發(fā)育的胚胎中，均可檢測到明顯的Atp5g1、Atp5g2和Atp5g3mRNA表達信號。但在假孕和延遲著床的子宮中，均檢測不到這三個基因的表達。當(dāng)用雌激素處理啟動胚胎著床后，在胚胎著床位點能夠檢測到這三個基因的特異性表達，其表達模式與正常妊娠第5天著床位點處類似。在人工誘導(dǎo)蛻膜化模型中，在對照側(cè)的小鼠子宮角

4、中檢測不到Atp5g1、Atp5g2和Atp5g3mRNA表達，但在注油的人工誘導(dǎo)蛻膜化的小鼠子宮角中，可檢測這三個基因在蛻膜細胞中強表達。在卵巢切除后注油的對照組小鼠子宮中，未檢測到這三個基因的表達，雌激素處理可以明顯刺激Atp5g1、Atp5g2和Atp5g3基因在小鼠子宮腔上皮和腺上皮中的表達，而雌激素與其受體拮抗劑共同處理能夠抑制雌激素對這些基因表達的誘導(dǎo)效應(yīng)。將含有Atp5g3基因啟動子序列的報告載體轉(zhuǎn)染入體外培養(yǎng)的原代小鼠子