低分子肝素對膿毒癥誘導大鼠急性腎損傷的保護作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、[目的]
   膿毒癥以及膿毒癥引起的靶器官損害病死率高達50%-90%,成為危重病急救醫(yī)學領域研究的熱點和難點。腎臟是最常受累的器官之一,急性腎損傷(AKI)已被公認為預測患者死亡的獨立危險因素,死亡率高達74.5%,其機制不完全清楚?;罨鞍證在膿毒癥上的成功應用,使抗凝劑在膿毒癥及其誘導的靶器官損傷中的保護作用得到了普遍的認同,因而推動了像肝素這樣具有抗炎和抗凝雙重作用的藥物研究。高遷移率族蛋白B1(HMGB1)作為膿毒癥

2、晚期重要炎性介質之一,不但具有促炎作用,而且還有明顯的促凝效應,被證實在膿毒癥的發(fā)展、轉歸及預后方面扮演著重要角色。為研究膿毒癥腎損傷的機制以及尋求膿毒癥器官損傷的保護方法,本研究觀察了低分子肝素(LMWH)對膿毒癥大鼠腎臟HMGB1、血漿腎損傷分子1(KIM-1)、血清肌酐等指標的影響,探討低分子肝素對膿毒癥大鼠腎損傷的保護作用及機制。
   [方法]
   采用盲腸結扎穿孔術(CLP)制作大鼠膿毒癥模型。將120只健

3、康雄性SD大鼠隨機分為假手術組、CLP組、實驗組(低分子肝素組),每組40只:①假手術組(n=40):無菌狀態(tài)下開腹尋找到盲腸后輕拉,再將其還納腹腔,然后逐層關腹,術后立即腹腔注射生理鹽水(NS)2mL及頭孢曲松(30mg/kg),每12h重復1次;②CLP組(n=40):CLP后立即腹腔注射生理鹽水2ml及頭孢曲松(30mg/kg),每12h重復1次;③低分子肝素治療組(實驗組n=40):CLP后立即腹腔注射低分子肝素鈉注射液(150

4、 U/kg)、生理鹽水2ml及頭孢曲松(30mg/kg),每12h重復1次。以術后3h、6h、12h、24h、48h為觀察點,觀察大鼠術后各時間點活動、進食、呼吸,豎毛、腹瀉、眼球凹陷、尿量等情況,于術后3h、6h、12h、24h、48 h隨機處死大鼠:采用逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法和Western blot法檢測腎組織中HMGB1基因和蛋白的表達水平,采用夾心酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測血漿KIM-1水平,生化法檢測

5、血清肌酐水平,同步記錄膿毒癥嚴重程度評分和半數(shù)生存時間。
   [結果]
   1.實驗組術后12 h、24 h、48 h各時段的膿毒癥評分顯著低于同期CLP組(P<0.05),顯著高于同期假手術組(P<0.05);半數(shù)生存時間顯著高于同期CLP組(P<0.05),顯著低于同期假手術組(P<0.05)。
   2.CLP組術后6 h、12 h、24 h、48 h各時段的HMGB1 mRNA和蛋白表達水平顯著高于同

6、期假手術組、實驗組和本組3 h時段(P<0.05);實驗組12 h、24 h、48 h各時段腎組織的HMGB1 mRNA和蛋白表達水平顯著低于同期CLP組(P<0.05),顯著高于同期假手術組(P<0.05)。
   3.CLP組術后6 h、12 h、24 h、48 h各時段的血漿KIM-1水平顯著高于同期假手術組、實驗組和本組3h時段(P<0.05);實驗組術后6 h、12 h、24 h、48 h各時段的血漿KIM-1水平顯著

7、高于同期假手術組(P<0.05),顯著低于同期CLP組(P<0.05)。
   4.CLP組術后24 h、48 h各時段的血清肌酐水平顯著高于同期假手術組、實驗組和本組3 h時段(P<0.05);實驗組各時段血清肌酐水平與同期假手術組的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),24 h、48 h各時段的血清肌酐水平顯著低于同期CLP組(P<0.05)。
   [結論]
   1.膿毒癥大鼠的腎HMGB1基因、蛋白表達水平

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