Bystin在反應性星形膠質細胞中的表達及其功能研究.pdf

1、已知bystin在早期胚胎著床過程中，通過與trophinin以及tastin形成一個復合物介導滋養(yǎng)層細胞以及子宮內膜細胞之間的黏附。然而，我們發(fā)現bystin在中樞神經系統(tǒng)中表達并且在6-OHDA損傷一側大鼠黑質紋狀體投射以及大腦皮層機械損傷模型大鼠中bystin表達水平顯著上調，而且bystin主要在反應性星形膠質細胞中表達。在體外培養(yǎng)星形膠質細胞中，促炎癥因子脂多糖，腦損傷后釋放的神經生長因子以及白細胞介素-1β均能引起bysti

2、n的表達上調，并且細胞內cAMP水平的上升也是導致bystin表達上調的一個重要因素。 通過對腦損傷后bystin的時空表達模式的觀察，我們發(fā)現bystin陽性星形膠質細胞在腦損傷近處逐漸增多并向損傷處聚集，提示bystin可能參與反應性星形膠質細胞的遷移過程。siRNA介導bystin表達下降后，體外培養(yǎng)的星形膠質細胞在穿孔實驗以及劃痕引起的遷移過程均受到明顯抑制，并且可能是通過抑制細胞片狀偽足的伸出而導致對細胞遷移的抑制。我

3、們發(fā)現正在遷移的星形膠質細胞中，bystin在片狀偽足的頂端邊緣與F-actin共定位，通過熒光能量共振轉移實驗結果顯示它們在此處直接結合。在正常星形膠質細胞中bystin定位于應力纖維上，在受到db-cAMP或細胞松弛素B等刺激后，bystin與F-actin發(fā)生一致的細胞亞定位變化。體外共沉降實驗也表明bystin與F-actin能直接結合，而且其結合可能是通過bystin中問段(134-256 aa)以及羧基端(257-436 a

4、a)所介導。而bystin在星形膠質細胞中的表達受到抑制導致了應力纖維的解聚并且在受到db-cAMP刺激后細胞更加易于發(fā)生星形化，表明在這些細胞中F-actin更加容易發(fā)生解聚，所以bystin可能起著穩(wěn)定F-actin的作用。在組成性激活突變型Racl轉染后的星形膠質細胞中，bystin被募集至應力纖維上，說明bystin與F-actin之間的相互作用受到Rac 1的調節(jié)。上述結果提示，bystin在星形膠質細胞中受Racl調節(jié)并與F