高原大鼠嚴(yán)重燙傷延遲復(fù)蘇后肝臟缺血缺氧損傷機制的實驗研究.pdf

1、目的：探討高原地區(qū)不同海拔高度嚴(yán)重燙傷延遲復(fù)蘇后大鼠肝臟損傷機制。
　　 方法：取健康雄性Wistar大鼠240只，隨機分為低海拔組(1517m)和高海拔組(3848m)，每個海拔高度隨機分為延遲復(fù)蘇組(DFR,n=50)、即時復(fù)蘇組(IFR,n=60)和假傷組(SG, n=10)，于背部建立總體表面積為30％的燙傷模型，分別于傷后1h、6h、12h、24h、72h和168h各取10只大鼠剖腹取材。采用組織病理學(xué)、手工組織芯片技

2、術(shù)、TUNEL法、免疫組化與圖象分析技術(shù)，檢測肝組織細胞凋亡、HIF-1α、P53、Bcl-2和HSP70在肝組織中的表達及其與細胞凋亡的關(guān)系。
　　 結(jié)果：
　　 1.隨海拔高度的增加，肝細胞渾濁腫脹、胞質(zhì)疏松化明顯，匯管區(qū)及肝竇內(nèi)炎細胞浸潤明顯，肝細胞壞死及嗜酸性小體逐漸增多。
　　 2.HIF-1α陽性表達多位于肝細胞核中，兩個海拔高度HIF-1α的表達強度實驗組均高于假傷組，隨海拔梯度上升，HIF-1α蛋

3、白表達增強，各海拔高度DFR組表達高于同海拔IFR組，在傷后6、12、24、72h時相點，海拔3848m各實驗組分別高于海拔1517m各實驗組。
　　 3.P53的陽性表達多位于肝細胞核中，胞漿也有少量表達，其表達其趨勢與HIF-1α蛋白表達趨勢基本一致，定量分析顯示亦與HIF-1α一致。
　　 4.各海拔高度假傷組即有Bcl-2的表達，同一海拔高度DFR組在傷后6h時相點表達強度高于相對應(yīng)的IFR組，高海拔DFR組與I

4、FR組在傷后6、72h時相點表達強于相應(yīng)的低海拔組。各試驗組于傷后6h Bcl-2表達最高，12h表達明顯下降，24h下降至最低水平。
　　 5.HSP70主要表達于肝細胞漿中，兩個海拔高度其表達強度實驗組均高于假傷組，隨海拔梯度上升，HSP70蛋白的表達增強，各海拔高度DFR組高于IFR組。
　　 6.肝細胞TUNEL陽性表達呈深棕色，染色質(zhì)濃縮，表達于肝細胞核內(nèi)，各海拔高度其表達強度DFR組和IFR組均高于SG組，隨

5、海拔高度上升TUNEL表達增強，各海拔高度DFR組表達強度高于同海拔IFR組，在傷后6、12、24、72h時相點，高海拔組細胞凋亡率均強于相應(yīng)的低海拔組。
　　 結(jié)論：
　　 1.隨海拔高度的增加，嚴(yán)重燙傷延遲復(fù)蘇大鼠肝組織病理損害明顯加重；
　　 2.高原地區(qū)嚴(yán)重燙傷延遲復(fù)蘇后肝細胞損傷與細胞凋亡有關(guān)，且肝細胞凋亡數(shù)量隨海拔梯度升高而增加；
　　 3.HIF-1α、P53可能參與了高原地區(qū)大鼠嚴(yán)重燙傷延