豬鏈球菌不同血清型抗血清的制備及在病原流行病學(xué)調(diào)查中的應(yīng)用.pdf

1、豬鏈球菌是豬群中一種常見(jiàn)的條件致病菌，在世界范圍內(nèi)分布十分廣泛，革蘭氏染色陽(yáng)性，血平板上呈α溶血，分為35個(gè)血清型。細(xì)菌通常定居在豬的上呼吸道(特別是扁桃體和鼻腔)、生殖道或消化道，嚴(yán)重時(shí)可引起肺炎、腦膜炎、敗血癥以及關(guān)節(jié)炎。人感染后也可出現(xiàn)腦膜炎、敗血癥、關(guān)節(jié)炎、肺炎、心內(nèi)腦炎、眼內(nèi)炎以及腹膜炎等嚴(yán)重癥狀，1968年丹麥第一次報(bào)道豬鏈球菌引發(fā)的腦膜炎病例，隨后，許多國(guó)家和地區(qū)又相繼出現(xiàn)過(guò)人感染豬鏈球菌的報(bào)道。我國(guó)每年也因豬鏈球菌遭受重

2、大的經(jīng)濟(jì)損失，甚至還出現(xiàn)過(guò)兩次嚴(yán)重的公共衛(wèi)生事件。本文對(duì)我國(guó)部分地區(qū)的豬鏈球菌流行情況進(jìn)行研究，從而為我國(guó)豬鏈球菌的防治提供依據(jù)。 1.豬鏈球菌抗血清的制備和初步應(yīng)用：用豬鏈球菌35個(gè)血清型的標(biāo)準(zhǔn)菌株制備抗原，經(jīng)靜脈免疫清潔級(jí)的新西蘭白兔，免疫結(jié)束后采集血液、分離血清，對(duì)存在交叉反應(yīng)的血清進(jìn)行吸附處理，經(jīng)試管凝集方法測(cè)定35個(gè)血清型抗血清的效價(jià)均高于1:32。對(duì)12株國(guó)內(nèi)豬鏈球菌分離株的凝集試驗(yàn)表明：抗血清只與相同血清型的菌株存

3、在凝集反應(yīng)，可以區(qū)分出PCR方法無(wú)法鑒別的1型和14型以及2型和1/2型，并在國(guó)內(nèi)首次鑒定出豬鏈球菌13型。 2.中國(guó)部分省份豬鏈球菌的流行病學(xué)調(diào)查：2006—2007年，從重慶、浙江23個(gè)區(qū)縣共采集1418份樣品，用針對(duì)谷氨酸脫氫酶(gdh)基因的PCR方法檢測(cè)，共得到229株豬鏈球菌，其中2006年重慶的1360份樣品中檢出222株豬鏈球菌；2007年重慶的20份樣品中檢出2株豬鏈球菌，浙江的20份樣品中分離到5株豬鏈球菌。

4、二重PCR檢測(cè)結(jié)果顯示：229株豬鏈球菌中共有18株可以確定血清型，其中1/2型2株、2型7株、7型4株、9型5株。 3.中國(guó)部分省份豬鏈球菌分離株的鑒定：本試驗(yàn)在PCR(針對(duì)gdh基因)鑒定的基礎(chǔ)上，用試管凝集法對(duì)重慶、杭州等地的26株豬鏈球菌分離株進(jìn)行定型，并用多位點(diǎn)序列分型技術(shù)研究其中的23株，結(jié)果顯示：中國(guó)重慶地區(qū)流行的豬鏈球菌主要是1/2、2、7、9以及15、16等血清型，杭州主要流行豬鏈球菌2型和7型；進(jìn)化樹(shù)顯示23