利魯唑對戊四氮致癲癇大鼠海馬CA3區(qū)GFAP、IL-1β及TNF-a的影響.pdf

1、[目的]
　　 采用戊四氮致癲癇大鼠模型，觀察大鼠癲癇發(fā)生發(fā)展過程中海馬CA3區(qū)神經膠質酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)及白細胞介素1β(interleukin-1 beta，IL-1β)、腫瘤壞死因α(tumor necrosis factor alpha，TNF-α)的表達情況，并應用利魯唑給予干預，觀察其在癲癇的發(fā)生、發(fā)展過程中對海馬CA3區(qū)GFAP、IL-1β及TNF-

2、α表達的影響，以期為探索臨床上治療癲癇疾病的新方法提供分子生物學實驗和理論依據，也為尋求癲癇疾病的早期診斷方法提供新的思路。
　　 [方法]
　　 健康雄性Sprague-Dawley，(SD)大鼠60只，隨機選取45只按35mg/kg·d進行腹腔注射戊四氮(Pentylenetetrazol，PTZ)溶液，連續(xù)注射30天，建立SD大鼠癲癇點燃模型。隨機分三組：對照組、PTZ組和利魯唑組。藥物利魯唑按10mg/kg·d灌

3、胃治療，另外兩組給予等量生理鹽水灌胃，30天后處死全部實驗動物，迅速斷頭取腦，于冰盒上快速分離海馬組織，固定包埋以備實驗。免疫組織化學法檢測各組大鼠海馬CA3區(qū)GFAP、IL-1β、TNF-α的表達和分布，利用計算機圖象對比分析各組大鼠海馬CA3區(qū)GFAP、IL-1β、TNF-α的表達水平。
　　 [結果]
　　 1.癲癇大鼠行為學觀察：造模SD大鼠均出現不同程度的癲癇發(fā)作，造模成功。
　　 2.GFAP免疫組化

4、染色：取海馬CA3區(qū)進行圖象對比分析：GFAP陽性細胞平均光密度值分別是：對照組0.119±0.0022(OD)；PTZ組0.132±0.0023(OD)；利魯唑組0.126±0.0031(OD)。PTZ組及利魯唑組GFAP陽性細胞表達顯著高于對照組(P<0.05)；PTZ組高于利魯唑組(P<0.05)。
　　 3.IL-1β免疫組化染色：取海馬CA3區(qū)進行圖象對比分析：IL-1β陽性細胞平均光密度值分別是：對照組0.210±0

5、.0020(OD)；PTZ組0.241±0.0024(OD)；利魯唑組0.220±0.0019(OD)。PTZ組及利魯唑組IL-1β陽性細胞表達顯著高于對照組(P<0.05)；PTZ組高于利魯唑組(P<0.05)。
　　 4.TNF-α免疫組化染色：取海馬CA3區(qū)進行圖象對比分析：TNF-α陽性細胞平均光密度值分別是：對照組0.191±0.0028(OD)；PTZ組0.230±0.0031(OD)；利魯唑組0.202±0.003

6、1(OD)。PTZ組及利魯唑組TNF-α陽性細胞表達顯著高于對照組(P<0.05)；PTZ組高于利魯唑組(P<0.05)。
　　 5.GFAP、IL-1β、TNF-α表達的相關性分析：大鼠海馬CA3區(qū)GFAP與IL-1β表達水平呈顯著正相關(n=45，r=0.845，P<0.01)；GFAP與TNF-α表達水平呈顯著正相關(n=45，r=0.849，P<0.01)；IL-1β與TNF-α表達水平呈顯著正相關(n=45，r=0.9

7、69，P<0.01)。
　　 [結論]
　　 1.SD大鼠癲癇發(fā)作后，其海馬CA3區(qū)發(fā)生一系列病理學改變，神經元變性、壞死；星形膠質細胞增殖活化，GFAP表達顯著增高；細胞因子IL-1β、TNF-α表達顯著增高。
　　 2.致癲癇SD大鼠海馬CA3區(qū)GFAP與IL-1β的表達、GFAP與TNF-α表達及IL-1β與TNF-α表達均呈顯著正相關。
　　 3.利魯唑可以減輕SD大鼠癲癇發(fā)作后的海馬CA3區(qū)神經