多功能蛋白P62在胰腺癌中的表達及其對胰腺癌惡性生物學行為影響的研究.pdf

1、目的：研究多功能應激反應蛋白P62在人胰腺癌細胞系、胰腺癌組織中的表達狀況，及其對人胰腺癌細胞系多種生物學行為的影響。
　　方法：蛋白印記（Western Blot）技術檢測P62在人胰腺癌SW細胞、MIA細胞、Panc-1細胞、BXPC-3細胞、ASPC-1細胞、CAP-2細胞中表達狀況；通過Western Blot和實時定量 PCR對人胰腺癌及對應癌旁組織的P62差異性表達進行檢測；采用免疫組化技術對20例人胰腺癌組織中p62

2、的表達狀況進行檢測；構建siRNA表達載體（Si-p62），并運用RT-PCR以及Western blot進行驗證；Si-p62抑制P62的表達，采用CCK-8法檢測單純干預P62基因后五種化療藥對胰腺癌細胞系增殖活性的影響；通過Transwell實驗及劃痕實驗檢測沉默P62表達后，其對人胰腺癌細胞運動功能（侵襲、轉(zhuǎn)移）的影響；PI染色流式細胞術檢測細胞周期；采用EDU法檢測細胞增殖；通過免疫熒光技術（Immunofluorescenc

3、e technique）檢測P62基因?qū)毎羌艿挠绊憽?br>　　結果：p62在12對胰腺癌組織中較之于對應的癌旁組織呈明顯的高表達，P62的高表達差異具有統(tǒng)計學意義。抑制P62基因的表達水平后對人胰腺細胞的細胞周期（G2/M期）產(chǎn)生了阻滯作用，其增殖活性被明顯抑制，且胰腺癌細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移運動能力也被明顯抑制，而免疫熒光染色顯示，P62干預的CAP-2細胞骨架形態(tài)未發(fā)生明顯改變。
　　結論：
　　1． P62在胰腺癌細胞