小麥感染藍矮病植原體細胞病理學及幾種防御酶活性變化.pdf

1、小麥藍矮病(Wheat Blue Drawf)是由條沙葉蟬(Psammotettix st riatus L．)?；詡鞑サ男←溨苍w(Phytoplasma)病害，目前僅在中國發(fā)生報道。該病主要發(fā)生在西北干旱、半干旱地區(qū)的晚熟冬麥區(qū)，近年逐步向南部中熟高產(chǎn)麥區(qū)蔓延，是當前西北干旱麥區(qū)間作套種及麥草覆蓋區(qū)的主要病害之一。 本研究分析了不同抗性小麥品種受小麥藍矮病植原體感染后，在細胞學水平發(fā)生的變化及病程相關酶類活性變化；利用熒光

2、顯微鏡技術觀察小麥及介體內植原體，并比較兩種切片技術的檢測效果及優(yōu)缺點。主要研究結果如下： 通過觀察接種小麥癥狀表現(xiàn)發(fā)現(xiàn)，小麥藍矮病的潛育期長短因品種抗性而異，感病品種潛育期為12d左右，抗病品種為18d左右。 利用引物secYF/secYR．，對在不同感病時期的不同品種病株體內總DNA進行植原體SecY基因擴增，檢測結果顯示：感病品種小麥6號在接種后15d就可以檢測到植原體特異性條帶，3個抗病品種在接種21d才能檢測到

3、特異性條帶。 DAPI熒光染色結果顯示：無論石蠟切片還是冰凍切片，在病葉韌皮部篩管組織及其薄壁細胞和帶毒蟲唾液腺中均可以觀察到特異性熒光，呈藍白色亮點、短粗亮線及小云片狀亮塊，而健康葉片和無毒蟲切片中觀察不到特異性熒光；同時發(fā)現(xiàn)冰凍切片中發(fā)出的熒光較石蠟切片強，病葉縱切片較橫切片檢測到植原體的幾率更高。這些結果證明冰凍切片結合：DAPI熒光染色技術是一種快速有效的小麥藍矮病的早期診斷和檢測技術。 透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)：在小麥

4、病株葉脈韌皮部篩管細胞及薄壁細胞內有大量典型的植原體，多以包含體的形式存在；隨著植原體的侵入，寄主細胞發(fā)生了一系列的超微結構病變：葉綠體膨脹畸形，部分葉綠體外膜破裂、基質流失、基粒降解，出現(xiàn)大量的淀粉粒和嗜餓顆粒：部分細胞核降解，核膜破裂、核質流失甚至核仁分散消失；線粒體在數(shù)量上有所增加，部分線粒體嵴出現(xiàn)降解。在健康植株葉片中未發(fā)現(xiàn)以上病變。植原體的侵染使抗病品種的過氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PLA)三種