CD71與Ki-67反映白血病細胞增殖狀況的關(guān)聯(lián)性分析.pdf

1、目的:
　　分析急性髓細胞白血病細胞系(HL-60)和慢性粒細胞白血病細胞系(K562)以及白血病患者骨髓標本中異常細胞CD71（轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1）和Ki-67（腫瘤增殖性核抗原）的表達情況以及兩者在評價細胞增殖活性方面的關(guān)系，探討以CD71代替Ki-67作為白血病腫瘤細胞增殖活性指標的可行性。
　　方法:
　　(1)細胞培養(yǎng)及骨髓標本的收集:培養(yǎng)HL-60細胞和K562細胞，繪制生長曲線，選取處于對數(shù)生長期的細胞;搜集

2、2013年5月～2014年1月鄭州大學第一附屬醫(yī)院中未經(jīng)治療的白血病患者的骨髓標本。
　　(2)CD71和Ki-67的表達情況及其陽性表達率的關(guān)聯(lián)性分析:用只破膜以及破膜和標記相應的同型對照抗體的同一種腫瘤細胞樣本調(diào)節(jié)流式細胞儀的電壓和補償，以進行破膜和標記Ki-67-FITC和CD71-PE的腫瘤細胞作為實驗組，檢測這些腫瘤細胞胞膜表面CD71蛋白和胞核中Ki-67蛋白的表達情況，并對CD71和Ki-67蛋白陽性表達率的相關(guān)性進

3、行分析。
　　(3)細胞增殖周期的分析:以腫瘤細胞系作為實驗組，以淋巴細胞分離液提取的正常人外周血中的淋巴細胞作為對照組，依次經(jīng)過固定和碘化丙啶(PI)標記后，用流式細胞儀檢測并用細胞周期分析軟件——ModFitLT分析腫瘤細胞中DNA含量的變化，計算出S期細胞比率(SPF)，確定腫瘤細胞的增殖活性，分析CD71的陽性表達率與SPF的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　(1)K562細胞和HL-60細胞的SPF均較對照組的SPF顯

4、著升高(p＜0.05)。K562細胞的SPF值較HL-60的SPF值低(p＜0.05)。
　　(2)K562細胞和HL-60細胞CD71的陽性表達率與SPF均呈正向線性相關(guān)(p＜0.05)。
　　(3)K562細胞和HL-60細胞CD71的陽性表達率明顯高于Ki-67的陽性表達率(p＜0.05)，其差值分別為32.35533±1.0022954和28.822857±2.264420;K562細胞和HL-60細胞中CD71的陽

5、性率與Ki-67陽性率均呈線性相關(guān)(p＜0.05)。
　　(4)7例急性髓細胞白血病(AML)患者骨髓標本中均不同程度地表達CD71，陽性率為(18.8629±12.27112)％;6例急性淋巴細胞白血病(ALL)患者骨髓標本中也均不同程度地表達CD71，陽性率為(24.072857±20.9185673)％。AML組異常細胞CD71與Ki-67的陽性表達率無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)，ALL組異常細胞CD71與Ki-67的陽性表

6、達率有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)
　　結(jié)論:
　　(1)隨著Ki-67表達強度的增高，K562細胞和HL-60細胞CD71的表達強度逐漸加強;與細胞增殖活性的變化相一致，HL-60細胞CD71的表達強度強于K562細胞;白血病患者骨髓中異常細胞均不同程度地表達CD71。因此，CD71可以作為腫瘤細胞增殖活性的指標。
　　(2)HL-60細胞和K562細胞中CD71的陽性表率與Ki-67的陽性表達率存在正向線性相關(guān)，且C