內(nèi)皮細(xì)胞來源的微囊泡促進(jìn)腹膜樣組織血管化的研究.pdf

1、目的：
　　研究臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞來源的微囊泡能否促進(jìn)大鼠來源的腹膜間皮細(xì)胞的增殖及使組織工程的腹膜樣組織血管化增強(qiáng)的可能性。
　　方法：
　?。?）采用I型膠原酶消化獲得人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，無血清應(yīng)激刺激臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞放微囊泡，同時(shí)收集微囊泡并對(duì)微囊泡行透射電鏡檢測(cè)和流式細(xì)胞術(shù)表面marker鑒定。（2）在體外試驗(yàn)中，大鼠來源的腹膜間皮細(xì)胞（PMC）與臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞來源微囊泡共培養(yǎng)，對(duì)PMC及細(xì)胞上清培養(yǎng)液液分別行CCK8

2、、RT-PCR和ELISA檢測(cè)。（3）在體內(nèi)試驗(yàn)中，腹膜間皮細(xì)胞種植在小腸粘膜下層的表面，實(shí)驗(yàn)組為加入了微囊泡而對(duì)照組未加微囊泡，預(yù)培養(yǎng)一周后將復(fù)合物移植入裸鼠皮下，2周后取出裸鼠皮下的腹膜樣組織行HE染色檢測(cè)。
　　結(jié)果：
　　通過透射電鏡可以看到人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞來源的微囊泡，大小形狀不一。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)微囊泡表達(dá) CD105、CD29，而 CD45未見表達(dá)。同時(shí)在加入微囊泡的實(shí)驗(yàn)組在體外與對(duì)照組相比能明顯促進(jìn)腹膜間皮

3、細(xì)胞（PMC）增殖（p<0.05）,加入微囊泡的實(shí)驗(yàn)組中VEGF濃度明顯高于對(duì)照組（p<0.05）。并同時(shí)對(duì)兩組腹膜間皮細(xì)胞行VEGF的mRNA表達(dá)情況行RT-PCR檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)加入微囊泡的實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組的表達(dá)是增高的。對(duì)皮下移植2周后取出的復(fù)合物染色顯示，加微囊泡的實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組新生的微血管樣結(jié)構(gòu)的數(shù)量是明顯增多的（p<0.05）。
　　結(jié)論：
　　我們證實(shí)了人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞來源的微囊泡能夠促進(jìn)大鼠來源的腹膜間皮細(xì)胞增殖，刺