桃蛀螟雄娥對雌娥體表烯烴的感受機制研究.pdf

1、桃蛀螟（Conegethes punctiferalis），屬鱗翅目草螟科(Lepidoptera: Crambidae)。其分布在東亞、南亞、澳大利亞等地區(qū)，而在我國多個地區(qū)也有分布，以幼蟲鉆蛀為害多種作物。目前桃蛀螟的防治方法包括農(nóng)業(yè)防治、生物防治和化學防治等，其中化學防治是主要的防治方法，但該方法有諸多不足，如農(nóng)藥殘留，農(nóng)藥抗性以及傷害天敵等。近年來，基于昆蟲信息素具有綠色環(huán)保的特點，其已廣泛用于害蟲的預測預報與防治實踐。桃蛀螟性

2、信息素主要成分是反-10-十六碳烯醛和順-10-十六碳烯醛的混合物（以下簡稱烯醛），但研究表明以該合成品為誘芯的誘捕器對雄蛾的引誘效果偏低。近年來有研究發(fā)現(xiàn)桃蛀螟雌蛾體表的兩種烯烴:順-9-二十七烯（以下簡稱二十七烯）和順，順，順-3，6，9-二十三碳三烯（以下簡稱二十三碳三烯）與烯醛混合后，能夠顯著增強雄蛾在風洞中的行為反應（近距離滯空飛行和敲打信息素源），然而，雄蛾對這兩種信息素烯烴的感受機制并不明確，影響其性誘劑技術(shù)的完善。為了明

3、確桃蛀螟雄蛾對信息素烯烴的感受機制，本研究開展了觸角電生理試驗(EAG)、氣相色譜觸角電位儀連用(GC-EAD)檢測試驗、風洞行為試驗，并對雄蛾觸角進行了轉(zhuǎn)錄組測序。以下為本研究獲得的主要實驗結(jié)果:
　　1.在EAG試驗中，用不同濃度的烯醛對雄蛾左右觸角進行測試，結(jié)果表明左右觸角對結(jié)果影響并無顯著性差異，為在后續(xù)試驗中隨機選擇觸角提供依據(jù)。在4種梯度濃度下（0.01;0.1;1.0和10頭當量濃度），雄蛾觸角分別對兩種烯烴的EAG

4、反應相對值之間，以及與正己烷之間均無差異，且均顯著低于烯醛。將兩種烯烴與烯醛混合后，其EAG反應相對值則與烯醛之間無顯著性差異。
　　2.GC-EAD實驗中，單獨測試時，雄蛾觸角對二十三碳三烯和二十七烯均無觸角電生理信號。將烯醛烯烴混合后進行測試時，也只測到了對烯醛的EAD反應。
　　3.風洞行為試驗方面，設置鐵絲網(wǎng)阻隔，避免雄蛾直接接觸濾紙（性信息素源）后發(fā)現(xiàn)，在行為指標—滯空飛行時間上，烯醛烯烴混合物的效果與性信息素粗提

5、物相當，并且顯著高于烯醛。進一步的選擇性試驗發(fā)現(xiàn)，在無阻隔的情況下，將烯醛與烯烴分別點滴在兩張濾紙上，并將濾紙分別懸掛在風洞中不同的空間位置（風洞軸向10 cm間隔和徑向2cm間隔）時，雄蛾僅對烯醛有反應，對烯烴沒有反應，而且對烯醛的反應強度與烯醛單獨測試時相當。
　　4.最后通過轉(zhuǎn)錄組技術(shù)進行了雄蛾觸角轉(zhuǎn)錄組測序，尋找與觸角嗅覺相關的氣味結(jié)合蛋白(OBP)、普通氣味結(jié)合蛋白(GOBP)、信息素結(jié)合蛋白(PBP)，并與家蠶、棉鈴蟲

6、的相關序列進行進化樹比對。通過轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析，桃蛀螟雄蛾觸角中鑒定出28個OBP基因，其中包括5個GOBP基因和5個PBP基因。
　　綜合EAG和風洞試驗結(jié)果，桃蛀螟雄蛾能夠在近距離通過嗅覺感受雌蛾體表的信息素烯烴，但是相對于烯醛的嗅覺反應而言，對烯烴的嗅覺反應相對微弱，不易通過觸角電生理方法進行檢測，其反應值可能低于觸角電位儀的檢測限。同時，從行為反應來看，只有當烯烴和烯醛同時從同一氣味點釋放時，雄蛾才會表現(xiàn)出對烯烴的行為反應。