高血壓心血管重構(gòu)過程中細胞增殖與凋亡的實驗研究.pdf

1、該研究應用病理形態(tài)學、細胞生物學及分子生物學方法和免疫組織化學技術(shù),動態(tài)觀察不同周齡自發(fā)性高血壓大鼠心肌、血管平滑肌細胞增生及凋亡變化情況,同時檢測凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax的表達以及其蛋自產(chǎn)物形成情況.并觀察血管緊張素IIATI受體桔抗劑Losartan和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑Enalapril對SHR心肌和血管平滑肌上述指標的影響,從增生與凋亡角度對高血壓心血管重構(gòu)機制以及Losartan、Enalapril的靶器官保護機制進行

2、探討,為臨床高血壓病的防治提供理論和實驗依據(jù).全文分兩部分,主要內(nèi)容及結(jié)果如下:第一部分心肌細胞增殖與凋亡在高血壓心臟肥大過程中的作用:洛沙但、依那普利降壓治療對SHR心肌細胞增殖與凋亡的影響目的:探討心肌細胞增殖與凋亡在高血壓心臟肥大過程中的作用;動態(tài)觀察血管緊張素AT<,1>-R阻滯劑洛沙坦和 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑依那普利降壓治療對SHR心肌細胞增殖與凋亡的影響.方法70只12周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)分為洛沙但治療組(S

3、HR- L)、依那普利治療組(SHR-E)和對照組(SHR- C),兩治療組從12周齡開始分別給予洛沙坦(30mg.kg<'-1>d<'-1>)和依那 普利(30mg.kg<'-1>d<'-1>)口服降壓治療4~12周:對照組正常飲食,此外,14只雄性正常血壓大鼠(WKY)也被用作對照.測定各組收縮壓、心臟肥厚指數(shù),用未端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導的dUTP未端標記法(TUNEL)和透射電鏡技術(shù)檢測心肌細胞凋亡,用RT- PCR檢測凋亡相關(guān)基

4、因Bax、Bcl- 2表達;同時用免疫組化技術(shù)檢狽、心肌細胞凋亡相關(guān)蛋白Bax 、Bcl- 2和細胞增殖核抗原(proliferatingceIlnuclearantigen,PCNA )的表達.結(jié)論(1)SHR 心臟肥大過程中心肌細胞存在凋亡與增殖失衡,凋亡而非增殖可能是心臟肥大形成的主要原因和機制之一,一定水平的凋亡是維持正常心臟結(jié)構(gòu)和功能所必需的.(2)SHR心 臟臟大過程中心肌細胞凋亡呈動態(tài)變化,存在一個凋亡時間窗.(3)凋亡促

5、進基因Bax及其蛋白和抑制基因Bcl-2及其蛋白共同參與心肌細胞凋亡的調(diào)控.(4)洛沙坦、依那普利降壓治療均使SHR心臟肥明厚顯逆轉(zhuǎn),對心肌細胞凋亡起抑制或促進的雙向性作用,即當SHR心肌細胞凋亡過多時,表現(xiàn)出凋亡抑制效應;當?shù)蛲霾蛔銜r,表現(xiàn)出促進作用,使心肌細胞凋亡與增殖維持一定的平衡.(5)洛沙坦、依那普利降壓治療對心肌細胞調(diào)亡的調(diào)節(jié)主要是通過影響凋亡促進基因Bax及其蛋白的表達獲得;當心肌細胞凋亡不足以維持一定的凋亡與增殖平衡時,

6、Bcl-2蛋白表達下調(diào)也是他們發(fā)揮凋亡調(diào)節(jié)效應所必需的機制之一.第二部分洛沙坦、依那普利降壓治療對SHR血管平滑肌細胞凋亡的影響陰滯劑洛沙坦和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑依尋普利降壓治療對SHR,平滑肌細胞凋亡的影響.方法70只12周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)分 為洛沙但治療組(SHR- L),依那普利治療組(SHR-E)和對照組(SHR-C), 兩治療組從12周齡開始分別給予洛沙但30mg.kg<-1>.d<'-1>和依那普利(30m

7、g.kg<-1>.d<'-1>)口服降壓治療4~12周:對照組正常飲食,此外,14只雄性正常血壓大鼠(WKY)也被用作對照.測定各組血壓,用末端脫氧核昔酸轉(zhuǎn)移酶介導的dUTP未端標記法(TUNEL)和透射電鏡技術(shù)檢測SHR血管平滑肌細胞凋仁,并分別用RT- PCR和免疫組化方法檢測凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2及其蛋白的表達.結(jié)論(1)細胞凋亡參與高血壓血管重構(gòu),凋亡不足可能是血管肥厚的主要原因之一.(2)洛沙但.依那普利長期降壓治療,