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1、南開大學(xué)碩士學(xué)位論文人乳腺癌細(xì)胞系經(jīng)誘導(dǎo)分化后差異表達(dá)基因的初步研究姓名:邢德印申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):七年制臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:馮玉梅毛慧生19990501南日K_.大學(xué)石泣二卜學(xué)1立論文PreliminaryStudyofDifferentialE沖ressedGeneinMCF7CellLineTreatedbyalltransRetinoicAcidGraduate:XingDeyinDepartment:ClinicalMedi
2、cineSupervisor:FengYumeiMaoHuishengLiuHongyinAbstractObjective:DevelopmRNAdifferentialdisplaypolymerasechainreaction(DDPCR)methodwithsilverstainingStudytheeffectofinduceddifferentiationinbreastcancercelllineMCF7treatedby
3、alltransretinoicacidandisolatedifferentiationrelativegenes.Methods:TotalRNAareextractedfromMCF7celllinetreatedbyalltransretinoicacidandcontrolones.AfterreversetranscriptionreactioncDNAsareamplifiedbyDDPCRusingthreeanchor
4、edprimersandfourarbitraryprimers.TheDNAbandsonpolyacrylamidegelsaredisplayedbysilverstainmethodthenthedifferentialdisplayedDNAbandsarevisuallyrecoveredfromgelsandreamplifiedbyPCR.Reamplifiedproductsareoftenamixtureofsimi
5、larsizewhicharedeterminedbysinglestrandconformationpolymorphisms(SSCP)gels.Results:ThereareobviousdifferencesincharacterizationofcellbiologyandgeneexpressionbetweenhumanbreastcancercelllinesMCF7beforeandafteralltransreti
6、noicacidtreatment.SeveralcDNAfragmentsexpressedaftertreatmentareisolatedoneofwhichis313bpsizeandhasbeendeterminedbySSCPgels.Conclusion:l.Thedevelopednonradioactivedifferentialdisplaytechniquewithsilverstainingisasimplese
7、nsitiveandefficientmethodforisolatingdifferentialexpressedgene2.AI]transretinoicacidplaysanimportantroleinregulatingthedifferentiationrelatedgeneexpression.Investigatingthisprocesswillhelpustoexplainthemechanismofinduced
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