泄?jié)峤舛痉綄冃越Y(jié)腸炎大鼠血清IL-1β、IL-10及結(jié)腸粘膜CD14的影響.pdf

1、目的:潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)是一種病因、發(fā)病機(jī)理尚不十分清楚的，以直腸、結(jié)腸粘膜及粘膜下層的炎癥和廣泛潰瘍形成為特點(diǎn)的慢性非特異性炎癥性疾病。本病病程長，病變范圍廣，可反復(fù)發(fā)作，治愈難度大，嚴(yán)重影響著患者的生活質(zhì)量和身心健康，被世界衛(wèi)生組織列為現(xiàn)代難治病之一。我們以泄?jié)嵘?、解毒祛瘀為大法組方，篩選出經(jīng)驗(yàn)方泄?jié)峤舛痉?，從多年的臨床經(jīng)驗(yàn)來看，本方對UC具有良好的療效。我們在前期研究的基礎(chǔ)上，通過建立UC

2、大鼠模型來研究泄?jié)峤舛痉綄C的治療作用及機(jī)理，特別是觀察其對UC大鼠血清IL-1β、IL-10及結(jié)腸粘膜CD14的影響，為進(jìn)一步的臨床研究和用藥提供理論依據(jù)。
　　方法:本實(shí)驗(yàn)選取健康清潔級(jí)wistar大鼠40只，體重220-250g，雄性，隨機(jī)分為5組，每組8只:空白對照組(BK)、模型組(MK)、磺胺吡啶組(LK)、泄?jié)峤舛痉礁邉┝拷M(GK)、泄?jié)峤舛痉降蛣┝拷M(DK)。采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇聯(lián)合造模法誘導(dǎo)大鼠潰

3、瘍性結(jié)腸炎動(dòng)物模型。造模后第3天，BK大鼠正常喂養(yǎng)，MK大鼠每日用生理鹽水灌胃，LK大鼠予柳氮磺胺吡啶(SASP)灌胃，GK、DK分別給予泄?jié)峤舛痉礁邉┝俊⒌蛣┝抗辔?，持續(xù)治療14天，觀察療效，研究作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)通過2個(gè)方面研究探討:實(shí)驗(yàn)一，觀察泄?jié)峤舛痉綄冃越Y(jié)腸炎大鼠一般狀態(tài)及結(jié)腸組織病理學(xué)的影響，測定大鼠血清IL-1β、IL-10的含量;實(shí)驗(yàn)二，觀察泄?jié)峤舛痉綄冃越Y(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜CD14的影響。
　　結(jié)果:
　

4、　1實(shí)驗(yàn)一:泄?jié)峤舛痉綄冃越Y(jié)腸炎大鼠一般狀況、結(jié)腸組織病理學(xué)及血清IL-1β、IL-10的影響
　　1.1大鼠的一般狀況及體重的變化
　　與BK比，MK及各治療組大鼠在精神狀態(tài)、毛發(fā)光澤度、進(jìn)食、體重、大便性狀等一般情況都有不同程度的改變。其中GK大鼠的精神逐漸恢復(fù)正常，毛色光澤，反應(yīng)靈敏，飲食增多，體重、大便等一般情況與BK組相近。
　　BK大鼠體重（340.37±6.56）正常，MK大鼠體重（258.62±6.

5、63）明顯下降，兩組相比差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。GK(313.00±4.69)、DK(290.75±7.61)、LK（292.87±7.58）與MK(258.62±6.63)相比，大鼠體重明顯增加，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與LK相比，GK大鼠體重明顯增加，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); DK大鼠差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。GK比DK大鼠體重明顯增加，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　1.2結(jié)腸大體形態(tài)

6、觀察與結(jié)腸病變?nèi)庋墼u分
　　BK大鼠的結(jié)腸黏膜完整連續(xù)、色澤淡紅、表面光滑，未見充血、水腫、潰瘍等病理改變。MK大鼠結(jié)腸粘膜充血、水腫、糜爛，可見散在潰瘍形成，潰瘍病灶周圍可見黑色壞死組織。GK大鼠結(jié)腸無明顯擴(kuò)張、增厚，未見充血、水腫，可見潰瘍愈合的瘢痕，其粘膜的恢復(fù)情況好于DK及LK。
　　MK大鼠評分（2.965±0.372）比BK評分（0.362±0.164）顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。GK(0.885

7、±0.128)、DK(1.647±0.137)、LK（1.589±0.146）與MK組相比，評分明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與LK比，GK評分顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);DK評分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。GK比DK評分明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　1.3光鏡下大鼠結(jié)腸黏膜組織形態(tài)
　　MK大鼠光鏡下可見結(jié)腸粘膜不同程度的充血、水腫，有糜爛和潰瘍形成，腺體破壞，結(jié)構(gòu)紊

8、亂，黏膜上皮部分缺失，黏膜下層有以中性粒細(xì)胞為主的大量炎性細(xì)胞浸潤。經(jīng)治療后GK大鼠的結(jié)腸粘膜完整，腺體排列較規(guī)則，間質(zhì)充血水腫不明顯，局部有少量炎性細(xì)胞浸潤，杯狀細(xì)胞豐富，其形態(tài)接近于BK，好于DK及LK大鼠。
　　1.4放射免疫法檢測UC大鼠血清IL-1β
　　MK大鼠血清IL-1β含量（0.205±0.009）比BK含量（0.108±0.010）明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與MK相比，GK（0.133±

9、0.010）、DK（0.167±0.016）、LK（0.169±0.009）大鼠血清IL-1β含量明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與LK比，GK含量顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); DK含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。GK比DK含量明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　1.5酶聯(lián)免疫法檢測UC大鼠血清IL-10
　　MK大鼠血清IL-10含量（22.03±2.82）比BK含量（39.

10、24±6.31）明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與MK相比，GK（37.60±2.55）、DK（30.12±3.38）、LK（28.98±3.90）大鼠血清IL-10含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與LK比，GK含量顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);DK含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。GK比DK含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2實(shí)驗(yàn)二:免疫組化法檢測大鼠結(jié)腸粘膜CD

11、14
　　MK大鼠平均光度（0.348±0.056）比BK大鼠（0.078±0.035）顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。GK（0.162±0.042）、DK（0.246±0.047）、LK（0.236±0.043）與MK組相比，平均光度明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與LK比，GK平均光度顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); DK平均光度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。GK比DK平均光度明顯降低，

12、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1本實(shí)驗(yàn)采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇聯(lián)合造模法誘導(dǎo)大鼠UC動(dòng)物模型是成功的。
　　2泄?jié)峤舛痉綄C炎大鼠有較好的治療作用，能顯著改善UC大鼠的一般情況和結(jié)腸組織形態(tài)，中藥高劑量組療效優(yōu)于中藥低劑量組及柳氮磺胺吡啶組。
　　3泄?jié)峤舛痉娇娠@著降低UC大鼠血清中IL-1β的含量，提高UC大鼠血清中IL-10的含量;泄?jié)峤舛痉綄C大鼠結(jié)腸粘膜中高表達(dá)的CD1