腎上腺惡性腫瘤中新型分子靶點的篩選及其意義.pdf

1、目的：
　　新生血管形成是腫瘤發(fā)生發(fā)展中必不可少的步驟之一，與腫瘤形成、侵襲、轉移及復發(fā)有著密切的關系。血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)與血管內皮生長因子受體2（vascular endothelial growth factor receptor-2，VEGFR-2）結合后，激活后者介導的酪氨酸激酶信號轉導通路，促進細胞增生，增加血管通透性，導致新的血管生成；類肝

2、素酶-1（Heparanase-1，HPA-1）通過釋放細胞外基質(extra cellular matrix，ECM)和基底膜(basement membrane，BM)上硫酸乙酰肝素（HS）側鏈結合的新生血管生長因子(如 bFGF，VEGF，PDG等)，促使 bFGF受體結合、二聚體形成和信號轉導間接促進新生血管生成。兩者在腎上腺皮質腫瘤中的表達及其對血管生成的作用研究不多，本研究通過免疫組化及形態(tài)定量分析，分別檢測良性腎上腺皮質腺

3、瘤和惡性腎上腺皮質癌中VEGF、VEGFR-2和HPA-1的表達情況，并用CD34標記血管內皮細胞，定量檢測微血管密度(microvessel density，MVD)的表達，結合臨床資料，探討它們在腎上腺皮質腫瘤發(fā)生、發(fā)展及血管形成中的意義。
　　方法：
　　1、選取上海瑞金醫(yī)院1986年到2010年間手術切除且有完整臨床和病理資料的腎上腺皮質腫瘤標本44例，將標本分為良性腎上腺皮質腺瘤（良性組）20例，ACC（惡性組）2

4、4例。
　　2、免疫組化標記采用間接法，EnVisionTM+檢測系統。
　　3、 HPA-1、VEGFR-2和 VEGF采用半定量計數法進行評分，以細胞染色強度和染色細胞所占比例兩種指標的積分之和作為判斷陽性或陰性的依據，若兩種積分之和大于3分則表達為陽性，小于或等于3分則為陰性。腫瘤內MVD計數：在低倍物鏡下選取高血管密度區(qū)，之后在高倍鏡(×400)下計數3個視野內被CD34染成棕黃色的血管數，取其平均值作為該例腫瘤的M

5、VD值。
　　4、比較并分析良、惡性腎上腺皮質腫瘤組織之間 VEGF、VEGFR-2、HPA-1的高、低表達率及MVD的區(qū)別。
　　結果：
　　1、 HPA-1在 ACC組中的表達為91.67％(22/24)，良性組中為15.00%(3/20)，ACC組與良性組之間 HPA-1的表達有極顯著性差異（P<0.01）；VEGF在ACC組中呈高表達(17/24，70．83％)，在良性組中表達較低(5/20，25.00%)，A

6、CC組與良性組之間VEGF的表達有顯著性差異（P<0.05）；VEGFR-2在 ACC組中呈高表達(19/24，79.17%)，在良性組中表達較低(5/20，25.00%)，兩者之間有顯著性差異（P<0.05）。
　　2、 MVD在 ACC組中的表達為(84.70±12.44)，顯著高于良性組(21．05±8．07)，差異具有統計學意義（P<0.05）。
　　3、 Spearman等級相關性分析顯示，VEGF的表達與MVD呈

7、正相關(rs=0.834，P<0.01)，HPA-1的表達與MVD也呈正相關(rs=0.812，P<0.01)，提示HPA-1和VEGF均是參與調控ACC中新生血管形成的功能因子。
　　結論：
　　HPA-1、VEGFR-2和 VEGF在腎上腺皮質癌組織中的蛋白表達高于皮質腺瘤組織，且HPA-1、VEGF的表達與MVD間呈正相關，提示HPA-1及VEGF在腎上腺皮質癌的血管形成和腫瘤生長中起重要作用。
　　目的：

8、>　　通過檢測熱休克蛋白-90（HSP90）和信號轉導和轉錄激活因子-3（STAT3）在良、惡性嗜鉻細胞瘤中的表達情況，探討HSP90和STAT3在早期診斷惡性嗜鉻細胞瘤中的價值，為鑒別嗜鉻細胞瘤的生物學行為提供依據。
　　方法：
　　選取上海瑞金醫(yī)院1986年到2010年間手術切除且有完整臨床和病理資料的腎上腺嗜鉻細胞瘤標本94例，將標本分為良性腎上腺嗜鉻細胞瘤（良性組）76例，惡性嗜鉻細胞瘤（惡性組）18例。免疫組織化學

9、方法檢測94例標本中HSP90和STAT3的表達。比較良、惡性腎上腺嗜鉻細胞瘤組織之間HSP90和STAT3的高、低表達率，并分析HSP90和STAT3聯合診斷惡性嗜鉻細胞瘤的效用。采用蛋白免疫印跡法檢測 HSP90和STAT3在24例手術標本（包括10例良性嗜鉻細胞瘤，7例惡性嗜鉻細胞瘤和7例正常腎上腺組織）中的表達,并進行性統計學分析。
　　結果：
　　1、HSP90在惡性嗜鉻細胞瘤中表達率為66.67%(12/18；9

10、5%CI44.89%to88.45%），在良性嗜鉻細胞瘤中的表達率為22.37%(17/76;95%CI13.00%to31.74%)，在正常腎上腺髓質組織中無表達，惡性嗜鉻細胞瘤組與良性嗜鉻細胞瘤組之間HSP90的表達存在顯著性差異(p=0.001)；HSP90診斷惡性嗜鉻細胞瘤的陽性預測值為0.41(95% CI0.23 to0.61)。
　　2、STAT3在惡性嗜鉻細胞瘤中表達率為83.33%(15/18;95%CI66.1

11、1%to100.55%)，在良性嗜鉻細胞瘤中的表達率為26.32%(20/76;95%CI16.42%to36.22%)，在正常腎上腺髓質組織中無表達，惡性嗜鉻細胞瘤組與良性嗜鉻細胞瘤組之間STAT3的表達存在顯著性差異(p<0.001)；STAT3診斷惡性嗜鉻細胞瘤的陽性預測值為0.44(95% CI0.26 to0.60)。
　　3、Western Blot分析結果顯示HSP90和STAT3在惡性嗜鉻細胞瘤中的蛋白表達水平遠高