間充質(zhì)干細胞移植對心衰大鼠心肌基質(zhì)金屬蛋白酶-9及抑制因子-1表達的影響.pdf

1、研究背景：擴張性心肌病是一種重要的心血管病，死亡率很高，有創(chuàng)的機械循環(huán)輔助和心臟移植是以往治療終末心衰的主要手段。細胞移植作為一種新的治療方法已開始應(yīng)用于心血管疾病，但目前的研究大多集中在改善心肌梗死區(qū)域的心功能和心肌組織的再生上，所使用的移植細胞包括了骨髓細胞、內(nèi)皮祖細胞、心肌細胞和間充質(zhì)干細胞等。特別是擁有多向分化潛能和易于擴增培養(yǎng)的間充質(zhì)干細胞。心肌病發(fā)生心力衰竭的主要機制是心肌細胞大量喪失(死亡和凋亡)和間質(zhì)重塑。骨髓間充質(zhì)干細

2、胞不僅可以歸巢心衰大鼠心肌組織和分化為心肌細胞并改善心功能而且可以調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶-9/基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1表達而影響心肌間質(zhì)纖維重塑。 目的：探討骨髓間充質(zhì)干細胞移植對阿霉素誘導(dǎo)的心衰大鼠心功能及心肌細胞基質(zhì)金屬蛋白酶-9及其抑制因子-1表達的影響。 方法： 1、取雌性Wister大鼠(n=38)先隨機選取8只作為正常對照組，其余30只腹腔注射阿霉素(2.5mg.kg-1，每周一次，連續(xù)6周)建立心衰模

3、型。6周后存活大鼠(n=21)隨機分為細胞移植組(n=11)和移植對照組(n=10)。正常對照組大鼠腹腔注射等量的生理鹽水。 2、體外分離，純化，增殖骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)并用含有12％胎牛血清的DAEM培養(yǎng)基培養(yǎng)，流式細胞儀對體外培養(yǎng)的MSCs行CD-44表型鑒定。取第三代MSCs進行移植，移植前MSCs用5-溴-2’脫氧尿苷(BrdU)進行標記。 3、末次阿霉素注射后一周，將5×106個MSCs通過鼠尾靜脈注射

4、的方法移植到移植組大鼠。心衰對照組大鼠注射等量培養(yǎng)基，正常組注射等量生理鹽水。移植后4周，采用超聲測量心功能及心室重塑，心臟切片行病理和免疫組化檢查了解移植細胞在受體心臟的存活情況及基質(zhì)金屬蛋白酶-9，基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1及cx-43表達情況。 結(jié)果： 體外培養(yǎng)的第三代MSCs流式細胞儀鑒定結(jié)果顯示：CD44陽性細胞數(shù)占99.7％±0.9％，心衰MSCs移植組心肌組織中可以見5-溴-2’脫氧尿苷標記的骨髓間充質(zhì)干細

5、胞(MSCs)歸巢，心衰細胞移植組間質(zhì)基質(zhì)金屬蛋白酶陽性表達比心衰對照組和正常對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)歸巢并表達細胞縫隙連接蛋白-43陽性。左室射血分數(shù)細胞移植組與心衰對照組和正常對照組分別為(87.26±1.64)％，(72.42±2.46)％，和(93.60+1.54)％，(P＜0.05)。細胞移植組相對于心衰對照組左室心功能差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。 結(jié)論：經(jīng)靜脈移植骨髓