氫氣鹽溶液減輕大鼠腦缺血再灌注氧化應(yīng)激損傷.pdf

1、研究背景和目的:
　　腦缺血再灌注損傷引發(fā)腦組織氧化應(yīng)激反應(yīng)，造成腦組織中活性氧離子增多脂質(zhì)過氧化，炎癥反應(yīng)等誘發(fā)腦組織損傷與功能改變。腦功能障礙是缺血再灌注后腦損傷的一個重要癥狀，記憶功能的改變也在其中。在對于缺血再灌注損傷的治療方法中，主要通過抗氧化，抗炎癥反應(yīng)來完成的。氫氣是一種自然界中廣泛存在的天然還原劑，它在自然界中存在于各種氧化還原的過程中，而氫離子也同時是生物體內(nèi)產(chǎn)生生物能的重要參與者。氫氣的生物作用機(jī)制，仍處于探索

2、期，但關(guān)于其在減輕缺血再灌注臟器損傷方面的，已有很多進(jìn)展。許多研究表明:氫氣可以通過清除機(jī)體產(chǎn)生的過氧活性離子，激活抗炎癥反應(yīng)信號通路等途徑來減輕缺血再灌注損傷。缺血再灌注后活性過氧離子(ReactiveOxidativeSpecies，ROS)增多，可以引起脂質(zhì)過氧化，進(jìn)而產(chǎn)生丙二醛(malondialdehyde，MDA)，損害生物膜的完整性等一系列細(xì)胞損傷。另外產(chǎn)生的脂質(zhì)氧化物與生物性蛋白結(jié)合影響生物信號傳導(dǎo)，干擾生物體內(nèi)的生化代

3、謝?；钚赃^氧離子還可以直接損傷生物體內(nèi)的核酸，激活凋亡通路誘發(fā)凋亡。
　　本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘接懲ㄟ^腹腔注射氫氣鹽溶液減輕大鼠腦缺血再灌注引起的氧化應(yīng)激損傷，是不否具有改善大鼠記憶功能的作用。從中獲取氫氣鹽溶液在改善認(rèn)知方面的有利信息，為氫氣鹽溶液作為一種新型的改善腦缺血再灌注損傷的藥物提供更多的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法:
　　選用10周齡無特定病原體(SpecificPathogenFree，SPF)級雄性SD(Sprague

4、-DawleyRat)大鼠120只，體重在220-250g之間（所有動物均由河南省實(shí)驗(yàn)動物中心提供）。飼養(yǎng)條件為屏障系統(tǒng)，每天日照時間12小時，蔽光12小時，清潔飲水滅菌飲料喂養(yǎng)。以雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎伴低血壓法建立腦缺血再灌注動物模型。所有實(shí)驗(yàn)用SD大鼠在實(shí)驗(yàn)前連續(xù)5天進(jìn)行水迷訓(xùn)練，待水迷宮訓(xùn)練測試達(dá)標(biāo)后。將實(shí)驗(yàn)用SD大鼠用隨機(jī)數(shù)字法分為三組:對照組(C)，40只SD大鼠進(jìn)行雙側(cè)頸總動脈游離，暴露后不進(jìn)行夾閉，術(shù)后以5ml/kg劑量于腹腔

5、注射4℃生理鹽水。生理鹽水組(S):40只SD大鼠游離雙側(cè)頸總動脈后結(jié)扎血壓維持在50mmHg15分鐘后松解，術(shù)后腹腔以5ml/kg劑量注射4℃生理鹽水。氫氣鹽溶液組(H):40只SD大鼠游離雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎維持動脈血壓50mmHg15分鐘后松解，術(shù)后腹腔以5ml/kg劑量注射4℃氫氣鹽溶液。每組10只SD大鼠分別于術(shù)后24小時、48小時、72小時處測量大鼠腦組織中丙二醛(MDA)含量、總超氧化物歧化酶(T-SOD)與谷胱甘肽過氧化物酶

6、(GSH—Px)活性，并于24小時，48小時，72小時行腦組織海馬區(qū)切片尼氏體染色。術(shù)后第三天行水迷宮測試。
　　結(jié)果:
　　1.生理鹽水組(S)與氫氣鹽溶液組(H)腦組織中丙二醛(Malonaldehyde，MDA)水平高于對照組(C)(P＜0.05)，但氫鹽溶液組在術(shù)后48小時、72小時明顯低于生理鹽水組水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2.氫氣鹽溶液組(H)在術(shù)后24小時、48小時、72小時腦組織中谷

7、胱甘肽過氧化酶（glutathioneperoxidase，GSH-Px）活性高于生理鹽水組(S)、對照組(C)(P＜0.05)。生理鹽水組(S)谷胱甘肽過氧化酶(glutathioneperoxidase，GSH-Px)活性于術(shù)后24小時、48小時、72小時低于對照組(C)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3.氫氣鹽溶液組(H)在術(shù)后24小時、48小時、72小時腦組織中超氧歧化酶(superoxidedismutase，

8、SOD)的活性高于生理鹽水組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4.氫氣鹽溶液組(H)、生理鹽水組(S)、對照組(C)在術(shù)后24小時、48小時、72小時海馬區(qū)尼氏體染色。對照組(C)海馬區(qū)尼氏染色切片細(xì)胞排列規(guī)則，細(xì)胞形態(tài)正常，無細(xì)胞壞死。生理鹽水組(S)海馬區(qū)尼氏切片細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞形態(tài)異常，多見細(xì)胞水腫壞死。氫氣鹽溶液組(H)海馬區(qū)尼氏染色切片細(xì)胞排列基本正常，細(xì)胞形態(tài)基本完好，少見細(xì)胞壞死，細(xì)胞水腫。
　　5.

9、水迷宮測試(MorrisWaterMazetest):生理鹽水組(S)平均登臺時間、平均登臺次數(shù)、平均登臺距離均低于對照組(C)(P＜0.05)，氫氣鹽溶液組(H)在平均登臺時間、平均登臺次數(shù)、平均登臺距離與對照組(C)無明顯差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.通過氫氣鹽溶液腹腔注射可以減少大鼠腦缺血再灌注氧化應(yīng)激造成的腦組織損傷。
　　2.通過腹腔注射氫氣鹽溶液能夠減少大鼠腦缺血再灌注引起的脂質(zhì)氧化產(chǎn)物丙二醛