兔關(guān)節(jié)軟骨細胞的培養(yǎng)及硝普鈉對其凋亡影響的實驗研究.pdf

1、目的：熟練掌握實驗室相關(guān)儀器的操作，培養(yǎng)無菌操作的實驗觀念，進行兔關(guān)節(jié)軟骨細胞的分離及培養(yǎng)，觀察兔關(guān)節(jié)軟骨細胞體外培養(yǎng)的生物學形態(tài)，進行不同濃度的硝普鈉作用不同的時間后誘導兔關(guān)節(jié)軟骨細胞凋亡的實驗，并檢測其凋亡率，來探討一氧化氮(NO)供體硝普鈉(SNP)誘導關(guān)節(jié)軟骨細胞凋亡的機制及關(guān)節(jié)軟骨細胞凋亡與骨關(guān)節(jié)炎(OA)的發(fā)生機制。 方法： 1．在實驗室進行不同實驗儀器的操作。 2．在實驗室進行無菌操作的動手鍛煉。

2、 3．在凈化操作臺上進行各種實驗試劑的配制。 4．在凈化操作臺上進行兔關(guān)節(jié)軟骨細胞的分離和培養(yǎng)。 5．在CO2培養(yǎng)箱內(nèi)進行兔關(guān)節(jié)軟骨細胞的培養(yǎng)。 6．在顯微鏡下觀察兔關(guān)節(jié)軟骨細胞的生物學形態(tài)。 7．在凈化操作臺上進行不同濃度的硝普鈉作用不同的時間后誘導兔關(guān)節(jié)軟骨細胞凋亡的實驗操作。 8．用流氏細胞儀檢測兔關(guān)節(jié)軟骨細胞凋亡，并對實驗結(jié)果進行統(tǒng)計學分析。 結(jié)果： 1．對兔關(guān)節(jié)軟骨

3、細胞生物學形態(tài)有了初步的認識。 2．成功建立NO供體SNP誘導軟骨細胞凋亡的模型3．軟骨細胞凋亡與SNP有一定的量效和時效關(guān)系。 4．不同的濃度組，不同的時間組采用組間配伍組設(shè)計資料的方差分析具有統(tǒng)計學意義(p＜0.01)。 5.2mmol/L濃度的硝普鈉誘導兔關(guān)節(jié)軟骨細胞凋亡，培養(yǎng)24小時后，其凋亡率明顯高于其他濃度和其他時間的對照組(p＜0.01)。 結(jié)論： 通過成功建立NO供體SNP誘導軟骨