纖維蛋白原β-148C-T基因多態(tài)性與腦梗死的相關性研究.pdf

1、目的：腦血管疾病以其高發(fā)病率、高致死率及高致殘率，與心臟病、惡性腫瘤構成人類的三大致死原因。分析流行病學調查研究表明，腦卒中的危險因素可分為可干預性和不可干預性兩類，可干預性危險因素是腦卒中一級預防的主要針對目標，包括高血壓、心臟病、糖尿病、血脂異常、高同型半胱氨酸血癥、吸煙、酗酒及肥胖等。不可干預危險因素包括年齡、性別、種族及遺傳因素等。不同種族腦卒中發(fā)病率不同。有卒中家族史者較陰性家族史者更易患卒中。眾多前瞻性流行病學調查和病例對照

2、研究表明，血漿纖維蛋白原（Fibrinogen，F(xiàn) g）增高是缺血性心腦血管疾病發(fā)生和發(fā)展的一個獨立危險因素。本實驗基于中國北方人的遺傳背景，研究纖維蛋白原基因的單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）與中國人腦梗死（cerebral infarction，CI）的相關關系，進一步探討腦梗死的發(fā)生機制。
　　 方法：（1）利用隨機數(shù)字表從河北省流行病調查人群中選擇90例人群對照，

3、同時搜集河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院住院腦梗死患者83例。（2）調查并記錄入選對象的一般情況（年齡、性別）、高血壓史、糖尿病史及吸煙、飲酒史，同時檢測并記錄相應的生化指標值：空腹血糖、血漿總膽固醇、高密度脂蛋白、甘油三酯。（3）對入選對象抽取外周靜脈血10ml，用經(jīng)典的酚-氯仿抽提法提取基因組DNA。（4）參考以往文獻，采用聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）對興趣片段進行擴增，經(jīng)電泳證實PCR產(chǎn)物。（5）

4、利用特異性內(nèi)切酶對擴增片段進行切割，電泳觀察酶切結果。即限制性片段長度多態(tài)性分析法（restriction fragment length polymorphism，RFLP）對F gβ-148C/T位點的多態(tài)性進行檢測。（6）隨機選取部分標本進行測序以驗證酶切結果。上海生工生物工程技術服務有限公司完成測序。（7）相關分析：計量資料以均數(shù)加減標準差表示，計量資料組間均數(shù)的比較采用t檢驗，計數(shù)資料組間基因型頻率和等位基因頻率比較采用X2檢

5、驗。經(jīng)多元Logistic回歸分析校正其它有意義的腦血管病危險因素，分析基因多態(tài)性與腦梗死發(fā)生的相關關系。所有統(tǒng)計學結果以P<0.05為有顯著性差異。
　　 結果：
　　 1.對腦梗死組和人群對照組F g基因β-148 C/T基因分布行Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗，結果如下：腦梗死組X2=3.188，P=0.074>0.05，人群對照組X2=0.245，P=0.621>0.05，均符合遺傳平衡，具有群體代表性

6、。
　　 2.CI組與對照組比較：F gβ-148C/T基因型及等位基因頻率分布差異均有顯著性。CI組 T/T基因型及T等位基因頻率分別為10.8％，26.5％，顯著高于人群對照組（2.2％，17.2％，P<0.05）。
　　 3.人群對照組與腦梗死組的幾項生化指標及性別、年齡、吸煙史、飲酒史等可能的危險因素分別進行單因素方差分析，結果得出：兩組之間總膽固醇（P<0.05），甘油三酯（P<0.05），差異有顯著性，其他指

7、標差異均無顯著性。
　　 4.將血漿總膽固醇（TC），甘油三酯（TG），等危險因素納入進行Logistic回歸分析，其中總膽固醇（OR=2.726>1）、甘油三酯（OR=3.578>1）為腦梗死的危險因素，可增加腦梗死發(fā)生的概率，余危險因素及F g基因β-148C/T多態(tài)性位點均未進入回歸方程。
　　 結論：
　　 1、Fg基因β-148 C/T多態(tài)性與CI的發(fā)生可能相關，T/T基因型及T等位基因的存在可能增加C