廣西產(chǎn)何首烏有效成分分離純化及生物活性研究.pdf

1、本文主要從以下幾部分展開(kāi)： 第一部分： 目的：分離純化制首烏醇提物的正丁醇萃取物：并初步探討各流份對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響。方法：采用聚酰胺柱色譜分離純化何首烏醇提取物的正丁醇萃取物；應(yīng)用IR、1H-NMR、13C-NMR對(duì)分離出的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定；MTT比色法檢測(cè)何首烏提取物正丁醇萃取物聚酰胺柱層析流份對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的作用；HE染色法觀察其流份對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞作用的形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果：利用聚酰

2、胺柱色譜技術(shù)，經(jīng)過(guò)乙醇水梯度洗脫，分離獲得5種流份，流份A經(jīng)硅膠柱層析分離得化合物Ⅰ(結(jié)構(gòu)待定)。經(jīng)聚酰胺柱層析洗脫的五種流份對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖具有不同的作用，其中E流份隨著濃度的增加，對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖具有促進(jìn)作用，顯微鏡下觀察到細(xì)胞的數(shù)量及分裂相增多。C和D流份對(duì)細(xì)胞的增殖影響不大，而B(niǎo)流份對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞具有抑制生長(zhǎng)作用，細(xì)胞的數(shù)量減少，核固縮。結(jié)論：聚酰胺柱色譜對(duì)何首烏提取物的多酚羥基類(lèi)物質(zhì)具有一定的分離效果；制首

3、烏提取物聚酰胺柱層析流份中含有促人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的活性物質(zhì)。 第二部分： 目的：分離純化生首烏水提物的乙酸乙酯萃取物；并初步探討無(wú)細(xì)胞毒性的流份對(duì)組蛋白去乙酰化酶活性的影響。方法：分別采用大孔吸附樹(shù)脂D101柱、羥丙基葡聚糖凝膠柱、重結(jié)晶等方法分離純化生首烏水提取物的乙酸乙酯萃取物；通過(guò)MTT法觀察流份的細(xì)胞毒性；酶聯(lián)吸附免疫法(ELISA)測(cè)定無(wú)細(xì)胞毒性的流份對(duì)人組蛋白去乙?；?HDAC)活性的影響。結(jié)果：利

4、用大孔樹(shù)脂D101柱色譜技術(shù)，經(jīng)過(guò)不同濃度的乙醇梯度沈脫，分離獲得A、B、C、D、E、F 6種流份。再將C流份過(guò)羥丙基葡聚糖凝膠柱，分離得到4種流份C1、C2、C3、C4。其中C1重結(jié)晶得到1個(gè)化合物，經(jīng)紅外核磁共振光譜初步鑒定為兒茶素。選用無(wú)細(xì)胞毒性的流份C、C2、C3進(jìn)行抑制組蛋白去乙酰化酶活性研究，其中流份C2、C3隨著濃度的增加，對(duì)鼻咽癌CNE-1細(xì)胞的組蛋白去乙?；富钚跃哂幸欢ǖ囊种谱饔茫唇?jīng)羥丙基葡聚糖凝膠柱分離的C流份