CysC對膿毒癥預后的評估價值和IRAKM基因多態(tài)性與膿毒癥關系的研究.pdf

1、目的：膿毒癥(sepsis)是臨床ICU病人死亡的重要原因，近年來醫(yī)學界對膿毒癥的發(fā)病機制進行深入的探討和研究，但至今尚未能充分闡明其發(fā)病機制。在危重患者中，常導致多器官功能衰竭，其中腎臟是最易受損的靶器官之一。膿毒癥的患者約42％伴有不同程度急性腎損傷。大量臨床研究顯示，腎功能輕度損傷即可導致患者病死率增加。目前臨床上反應腎小球慮過功能的指標如尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、血肌酐(Serum creatin

2、ine，Scr)、內(nèi)生肌酐清除率(clearance rate of endogenous creatinine，Ccr)等都存在一定的局限性，且不同程度地受到一些腎外因素的干擾。胱抑素C(CystatinC，CysC)是一種反映腎小球慮過率(glomerular filtration rate，GFR)和早期腎損傷的內(nèi)源性標志物。比Scr更準確地反映GFR。如果通過檢測血清中的CysC濃度，能在GFR開始下降時，或在腎臟有輕微損傷而G

3、FR尚正常的階段及時發(fā)現(xiàn)，及早干預，將有助于降低膿毒癥患者的病死率。
　　流行病學調(diào)查顯示，黑人膿毒癥易感性比白人高，死亡率也明顯高于其他人種，故遺傳因素對膿毒癥的易感性和臨床轉歸具有重要作用。白介素1受體相關激酶M((interlukin-lrecepter associated kinaseM，IRAKM)是Toll樣受體(Toll-like receptors，TLR)信號途徑中的負向調(diào)節(jié)因子，在多種感染性及非感染性疾病中，

4、IRAKM可通過抑制前炎癥因子的產(chǎn)生而調(diào)節(jié)免疫自穩(wěn)和免疫耐受。在膿毒癥的發(fā)展過程中IRAKM發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。但目前對IRAKM基因多態(tài)性是否與膿毒癥易感性和預后相關，國內(nèi)外研究較少。
　　本研究以53例膿毒癥患者為研究對象，探討血清CysC對膿毒癥預后的評估價值以及IRAKM+22148位點的基因多態(tài)性與膿毒癥易感性和預后的關系。通過測定血清TNF-α和IL-6水平判斷IRAKM+22148位點的變異是否影響下游細胞因子的表達

5、。
　　方法：1.免疫比濁法測定血清CysC的水平，將53例膿毒癥患者分為存活組和死亡組，存活組36例，死亡組17例，采用t檢驗比較兩組間血清CysC的水平，分析血清CysC對膿毒癥預后的評估價值。2.人全血基因組DNA提取試劑盒提取外周血DNA，根據(jù)相關文獻設計聚合酶鏈反應(Polymerase chainreaction，PCR)引物，擴增IRAKM基因+22148位點附近序列，采用PCR-限制性片段長度多態(tài)性(restric

6、t fragment length polymorphisms，RLFP)的方法進行基因多態(tài)性分析。3.采用X2檢驗比較膿毒癥組與對照組基因型頻率及等位基因頻率分布差異，分析IRAKM+22148位點基因多態(tài)性與膿毒癥易感性的關系。計算等位基因OR值和95%可信區(qū)間評價其相對患病風險。4.采用X2檢驗比較不同基因型膿毒癥患者的病死率，分析IRAKM+22148位點基因多態(tài)性是否與膿毒癥預后相關。5.應用酶聯(lián)免疫分析(Enzyme lin

7、ked immunosorbentassay，ELISA)測定血清TNF-a和IL-6的水平，采用t檢驗比較不同基因型膿毒癥患者血清TNF-a和IL-6的水平。
　　結果：1.膿毒癥死亡組CysC水平高于存活組。2.中國漢族人群存在IRAKM+22148位點基因多態(tài)性，即GG、GA和AA三種基因型。但病例組與對照組比較基因型頻率分布差別無統(tǒng)計學意義，而兩組間等位基因頻率分布差別具有統(tǒng)計學意義。膿毒癥患者G等位基因頻率高于對照組OR