免疫抑制性分子sHLA-G、ILT2在NSCLC患者體內的表達及其相關性的研究.pdf

1、目的:
　　 人類免疫球蛋白樣轉錄子2(Immunoglobulin-like transcript receptor2，ILT2)作為與體內重要的免疫抑制分子可溶性人類白細胞抗原G(Soluble HumanLeukocyte Antigen G sHLA-G)有著結合力極強的受體，研究其如何發(fā)揮免疫調節(jié)作用可為探討體內腫瘤發(fā)病機制，對其進行早期預防、早期診斷、早期治療提供新的思路。本研究通過檢測非小細胞肺癌(non-smal

2、l-cell carcinoma，NSCLC)患者外周血血漿免疫抑制性分子sHLA-G水平、PBMC表達ILT2在各類免疫細胞上的變化，并探討它們之間的互相關系，為深入研究非小細胞肺癌患者體內腫瘤細胞的免疫逃避作用機制提供新思路。
　　 方法:
　　 1.NSCLC患者及臨床資料的收集依據(jù)NSCLC診斷均符合國際肺癌研究協(xié)會(IASLC)與世界衛(wèi)生組織(WHO)1998年分類標準，選取浙江省臺州醫(yī)院胸外科2012年3月至

3、2012年9月期間就診41例NSCLC患者及41例健康人群外周血標本。采集血液后收集其臨床資料，如年齡、性別、吸煙與否、分化程度、組織學分型、TNM分期等數(shù)據(jù)結果。
　　 2.NSCLC患者外周血血漿中sHLA-G表達水平測定收集的41例NSCLC患者、41例健康人的新鮮外周血血漿，用酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-linkedImmunosorbent Assay，ELISA)檢測血漿中的sHLA-G表達水平。研究其與其臨床資料

4、，如年齡、性別、吸煙與否、分化程度、組織學分型、TNM分期等數(shù)據(jù)結果等的關聯(lián)性。
　　 3.NSCLC患者PBMC免疫球蛋白樣轉錄子ILT2表達的檢測收集41例NSCLC患者、19例肺部良性腫瘤患者、41例健康人的新鮮外周血，EDTA抗凝后，流式細胞術檢測其新鮮外周血單個核細胞(peripheral bloodmononuclear cells，PBMCs)表面ILT2表達的百分率及熒光強度(mean relativefluor

5、escence intensity, MRFI)。研究其與其臨床資料，如年齡、性別、吸煙與否、分化程度、組織學分型、TNM分期等數(shù)據(jù)結果等的關聯(lián)性。
　　 4.數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析用SPSS13.0軟件分析實驗數(shù)據(jù)，計量資料進行正態(tài)性檢驗及方差齊性檢驗及合理描述;非正態(tài)分布的計量資料組間比較采用秩和檢驗，兩變量相關性采用Spearman相關分析;以P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 1.非小細胞患者外周血

6、血漿中sHLA-G表達水平測定NSCLC患者sHLA-G分子表達水平明顯高于正常對照組(P＜0.05)，且sHLA-G表達水平與NSCLC患者腫瘤TMN分期顯著相關，但與其他各臨床因素沒有顯著相關性，且血漿中sHLA-G與ILT2的表達水平之間也無顯著相關性。
　　 2.非小細胞肺癌患者PBMC免疫球蛋白樣轉錄子ILT2表達的檢測 ILT2在各單個核細胞上的表達差異較大。①NSCLC患者組CD14+單核細胞、CD56+NK細胞I

7、LT2陽性表達的百分比和平均相對熒光強度分別與健康對照組及良性腫瘤組比較，無顯著差異（P均＞0.05）。②NSCLC患者組CD3+T細胞、CD19+B細胞ILT2陽性表達的百分比和平均相對熒光強度分別與健康對照組及良性腫瘤組比較均明顯下降，且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。③肺部良性腫瘤組PBMC各種免疫細胞ILT2陽性表達的百分比和平均相對熒光強度與健康對照組比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。④將41例NSCLC患者按年齡、

8、性別、吸煙與否、分化程度、組織學分型、TNM分期進行分類比較發(fā)現(xiàn)，患者PBMC上ILT2的表達在年齡、性別、吸煙與否、分化程度及TNM分期上的差異均無統(tǒng)計學意義(P均＞0.05)。⑤在組織學分型中肺腺癌患者CD3+T細胞ILT2陽性表達的百分比低于肺鱗癌(P＜0.05)，及肺腺癌患者CD19+B細胞上表達ILT2平均相對熒光強度也低于肺鱗癌(P＜0.05)。
　　 結論:
　　 NSCLC患者CD3+T細胞和CD19+B

9、細胞ILT2陽性表達的百分比和平均相對熒光強度異常下降，且與組織學分型相關;并且NSCLC患者外周血血漿sHLA-G異常升高，提示了NSCLC患者體內激活或抑制信號間的不平衡，而激活或抑制信號間的相互平衡才能維持體內正常免疫應答，說明免疫抑制分子HLA-G、ITL2可能參與非小細胞肺癌患者體內腫瘤細胞的免疫逃避反應。ILT2作為與體內重要的免疫抑制分子，與HLA-G有著結合力極強的受體，研究它們的表達與NSCLC患者組織學分型等臨床資料