乙肝表面抗原DNA疫苗初免—蛋白疫苗加強免疫策略增強免疫反應的蛋白質組學分析.pdf

1、DNA初免-蛋白質加強的免疫策略已經廣泛應用以增強這兩種疫苗的免疫原性，但是這種免疫增效的機制目前還不清楚。我們以pVAX1質粒為載體構建了表達乙肝表面抗原的真核表達質粒pVAX-S，用pVAX-S和重組乙肝表面抗原以C57BL/6小鼠為實驗動物實施了DDD、DDS、SSS和SSD4種不同的免疫策略。在第一次免疫后第3周、7周、11周、15周、19周和23周用酶聯免疫吸附法檢測了這些小鼠的總抗體滴度，第11周用混合淋巴細胞反應檢測了不同

2、免疫組小鼠的T細胞免疫記憶強度和樹突狀細胞刺激T細胞增殖的能力，第23周用RocheAssayMedium分光法按效應細胞/靶細胞1：50的比例檢測了CTL活性。我們觀察到DDS組小鼠擁有最強的免疫記憶，無論抗體滴度、CTL活性、T細胞免疫記憶強度還是樹突狀細胞激活T細胞的能力都比其它免疫組以及空白對照組的小鼠更強。我們進一步進行了比較血清蛋白質組學的研究，以期能闡明這種免疫增效作用的機制。以非免疫組小鼠作參照膠，我們發(fā)現DDS組小鼠有

3、5個蛋白上調、17個蛋白下調；而SSS組小鼠則有7個蛋白上調、10個蛋白下調。在DDS組中唯一出現的3個蛋白質periplakin、F-boxprotein30和calpain的生理功能都和免疫反應有一定的關系。這3個蛋白可以作為潛在的成功免疫的新型分子標記物，也可能成為疫苗作用機制的新研究目標。在我們的一個在研項目中，我們用豬帶絳蟲囊尾蚴抗原膜聯蛋白B1DNA疫苗和蛋白質疫苗對小鼠進行免疫后分析其血清蛋白質組，初步得到6個特異性表達蛋