內(nèi)皮細胞a7受體與血管新生之間關系的研究.pdf

1、背景:血管新生在人類健康中具有重要的生理學及病理學意義。生理學血管新生不僅在機體胚胎發(fā)育中起重要作用，是機體各組織器官發(fā)育分化的前提，而且是成人創(chuàng)傷愈合和女性月經(jīng)周期正常維持的保障。而病理性血管生成則與人類多種疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關。如惡性腫瘤、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、類風濕性關節(jié)炎。因此進行血管新生內(nèi)皮靶標的研究具有重要意義。α7受體屬于配體門控離子通道型受體，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)具有十分重要作用，參與神經(jīng)通路形成、維持和多種生

2、理功能調(diào)節(jié)。而在非神經(jīng)細胞-內(nèi)皮細胞，α7受體參與內(nèi)皮細胞多種生物活性物質(zhì)的分泌和釋放，參與內(nèi)皮細胞與其他細胞間信號轉(zhuǎn)導，參與內(nèi)皮細胞血管新生調(diào)節(jié)，從而提出了血管新生內(nèi)皮細胞乙酰膽堿新靶標。本研究首先以內(nèi)皮細胞α7受體為靶標，HUVECs、心梗大鼠和荷瘤小鼠體內(nèi)移植瘤為模型，了解α7受體在HUVECs、心梗大鼠內(nèi)皮細胞基因及蛋白水平的表達及其配體的調(diào)節(jié)作用，以及α7受體在細胞機制和體內(nèi)外血管新生中的調(diào)節(jié)作用。以探討α7受體作為一種局部“

3、荷爾蒙”受體，在內(nèi)皮細胞上的藥理學特征及其在血管新生中的調(diào)節(jié)作用。其次本研究對25種沙利度胺類新衍生物進行篩選，旨在發(fā)現(xiàn)具有抑制血管新生作用的先導化合物。 方法:1、RT-PCR和免疫組化測HUVECsα7受體mRNA和蛋白表達，并探討煙堿、膽堿、美加明和α-BTX對α7受體表達的影響。共聚焦顯微鏡、MTT和體外血管索鑒定探討α7受體對HUVEC細胞機制的影響。大鼠心梗模型和荷瘤小鼠體內(nèi)移植瘤模型探討α7受體與血管新生之間的關系

4、。2、首先通過MTT法篩選25種沙利度胺類新衍生物中具有內(nèi)皮細胞特異性抑制作用的新衍生物，隨后通過荷瘤小鼠體內(nèi)移植瘤模型了解具有內(nèi)皮細胞特異性抑制作用的新衍生物對荷瘤小鼠體內(nèi)移植瘤生長及移植瘤內(nèi)毛細血管密度的影響。 結(jié)果:1、內(nèi)皮細胞表達α7受體。2、在非興奮性細胞-內(nèi)皮細胞，激動劑上調(diào)α7受體表達，并能夠促進胞內(nèi)Ca2+釋放、內(nèi)皮細胞增殖及體外血管索形成，促進血管新生而促進側(cè)枝循環(huán)的建立和腫瘤生長；拮抗劑作用反之。3、沙利度胺

5、類新衍生物中W-37和W-42衍生物通過抑制荷瘤小鼠體內(nèi)移植瘤血管新生而抑制移植瘤生長。 結(jié)論:興奮性與非興奮性細胞α7受體mRNA表達機制不完全相同。可能存在α7受體的多樣性：①、非興奮性細胞與興奮性細胞α7受體結(jié)構(gòu)不同，因而功能不同。②、同一組織α7受體存在著不同的結(jié)構(gòu)，不同結(jié)構(gòu)發(fā)揮著不同的功能。③、興奮性與非興奮性細胞α7受體結(jié)構(gòu)相同，但不同部位α7受體表達及功能不完全相同。內(nèi)皮細胞α7受體可作為血管新生靶標而用于血管新生