不同時限缺血預處理對大鼠膽管缺血再灌注損傷的保護差異.pdf

1、目的：研究缺血預處理可否通過上調凋亡抑制基因Bcl-2、下調凋亡促進基因Bax的表達而減少因凋亡引起的肝內外膽管的損傷，同時比較5分鐘時限、10分鐘時限缺血預處理后的Bcl-2/Bax比值是否有差別，并根據(jù)比值差異分析何種時限缺血預處理方式對抵抗膽管缺血再灌注損傷更有利。 方法：健康雄性SD大鼠40只，按Chien CT等的方法建立肝臟原位缺血再灌注模型，分為四組：假手術組(SO)、直接缺血60分鐘組(IR)、5分鐘時限缺血預處

2、理組(IP5)、10分鐘時限缺血預處理組(IP10)。術后24小時腹主動脈采血測定生化指標，取肝左葉組織分別用免疫組化染色及原位雜交染色的方法測定其中Bcl-2、Bax蛋白及其基因。并對肝臟標本進行TUNEL染色識別典型凋亡細胞計算凋亡指數(shù)AI。所得數(shù)據(jù)以均數(shù)士標準差(x±s)表示，組間比較采用單因素方差分析和SNK法進行兩兩比較，以P<0.05為有統(tǒng)計學差異；IP組間以P<0.10為有統(tǒng)計學意義。 結果：SO組、IR組及IP各

3、組模型建立成功，假手術組發(fā)生凋亡的膽管上皮細胞少，IR組凋亡的膽管上皮細胞增多，IP組發(fā)生凋亡的膽管上皮細胞數(shù)相對于IR組又減少(P<0.05)。膽管上皮細胞凋亡抑制基因Bcl-2的mRNA和蛋白的表達在假手術組表達較低，在IR及IP各組表達均增高，其中IR組表達較IP組表達降低，同時IP組間以5分鐘時限IP組較10分鐘IP組Bcl-2的mRNA和蛋白表達略高P<0.10)，故認為缺血預處理時限以5分鐘為宜、且5分鐘缺血預處理過程即可得

4、到滿意效果；凋亡促進基因Bax的mRNA和蛋白的表達在假手術組表達低(P<0.05)，而在IR及IP各組表達雖有差異但并無統(tǒng)計學意義(P>0.10)，這個結果提示IP可以上調凋亡抑制基因Bcl-2而發(fā)揮對膽管上皮的保護作用，而凋亡促進基因Bax表達與保護作用無直接關系。 結論： 1.肝臟缺血再灌注引發(fā)膽管上皮細胞凋亡。 2.常溫下缺血預處理可以減輕肝臟缺血再灌注損傷中膽管損傷。 3.缺血預處理對膽管上皮細