供肝缺血預處理對大鼠冷保存移植肝缺血再灌注損傷的保護作用及免疫機制研究.pdf

1、目的:建立穩(wěn)定可靠的原位肝移植模型，探討供肝熱缺血預處理對大鼠供肝冷缺血再灌注損傷中的保護作用及其機制。 方法:采用SD大鼠原位肝移植動物模型，供肝冷缺血期為120min，受體無肝期20min，隨機分為3組：假手術組，獲取供肝前僅作肝臟周圍韌帶的解剖；肝移植組，獲取供肝前不作肝門阻斷；IPC組，獲取供肝前阻斷肝門5min，再灌注5min。術后2、4、24、72h檢測血清ALT、LDH、抗氧化酶活力、血清NO水平、細胞因子TNF-

2、a及門靜脈血內(nèi)毒素水平。流式細胞檢測血清共刺激分子B7.1及B7.2表達，血清細胞因子IL-2、IL-10，RT-PCR檢測移植肝組織中TLR2mRNA、NF-κBmRNA及TNF-αmRNA表達。 結果:肝移植組及IPC組術后ALT、LDH及過氧化物含量均明顯高于假手術組，而且IPC組低于肝移植組，其抗氧化酶活力較移植組明顯升高；NO水平在IPC術后2、4、24及72h均顯著高于假手術組，72h時肝移植組明顯高于IPC組及假手

3、術組，而IPC組高于假手術組；門靜脈血清中內(nèi)毒素的含量IPC組較移植組明顯降低，但高于假手術組；肝移植組血清中TNF-α釋放明顯增加，與假手術組相比差異顯著；IPC組與肝移植組相比顯著地降低TNF-α的釋放。肝移植組及IPC組術后共刺激分子B7.1及B7.2表達明顯高于假手術組，且IPC組低于肝移植組；肝移植組血清中TNF-α釋放明顯增加，與假手術組相比差異顯著；肝移植組血清IL-2水平在肝移植組明顯高于IPC組，而IL-10水平卻明顯

4、低于IPC組。肝移植組移植肝組織中TLR2mRNA、NF-κBmRNA及TNF-amRNA表達均高于IPC組，其差異有顯著性。 結論:供肝熱缺血預處理對大鼠供肝冷缺血再灌注損傷具有明顯保護作用，其機制可能是降低了內(nèi)毒素水平，快速提高了血清中NO水平，且維持在較穩(wěn)定水平，打開了第二保護窗，抑制了血清TNF-a含量，同時IPC下調(diào)了共刺激分子B7及TLR2mRNA的表達，降低了NF-κBmRNA表達水平，從而降低了血清IL-2水平，