泛素蛋白酶體制M劑MG-132對幼鼠高氧肺損傷細胞凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　 在危重兒童尤其是新生兒的救治過程中，常需要長時間吸入高濃度氧(簡稱高氧)，但是長時間吸入高氧后，可導致急性肺損傷。引起高氧肺損傷的機制很多，目前認為凋亡在高氧肺損傷的發(fā)病過程中具有十分重要的作用。泛素-蛋白酶體途徑(UPP)是細胞內蛋白質選擇性降解的重要途徑，參與細胞的多種生理活動過程，比如凋亡等。蛋白酶體抑制劑MG-132，可以阻斷UPP，早期的研究將其用于抑制腫瘤生長、抑制心肌缺血再灌注損傷等。目前還沒有將MG

2、-132用于高氧肺損傷防治的研究報告。
　　 本研究通過高氧肺損傷大鼠模型，觀察UPP在高氧肺損傷過程中所起作用，觀察蛋白酶體抑制劑MG-132對肺損傷和凋亡的影響及其機制，旨在探討高氧肺損傷發(fā)病機制，以期找到一種新的確切的早期干預、治療高氧肺損傷的方法。
　　 方法：
　　 1.建立高氧肺損傷大鼠模型：大鼠常壓下持續(xù)吸入高濃度氧(FiO2950ml/L)72小時。
　　 2.將26只幼年SD大鼠隨機分為

3、四組：
　　 ①空氣對照組(n=5)；
　　 ②高氧組(n=8)；
　　 ③高氧加蛋白酶體抑制劑組(n=8)(腹腔內注射MG-132，0.5mg/kg，qd×3)；
　　 ④空氣加蛋白酶體抑制劑組(n=5)(腹腔內注射MG-132，0.5mg/kg，qd×3)。
　　 3.觀察大鼠肺損傷形態(tài)學改變，進行肺組織大體病理分級及肺損傷病理評分。
　　 4.根據TUNEL法計算肺組織凋亡指數。

4、r>　　 5.檢測肺臟細胞中泛素化蛋白的表達。
　　 6.檢測肺臟細胞中Bcl-2類蛋白、Bax類蛋白和P38 MAPK的表達。
　　 結果：
　　 1.成功復制了高氧肺損傷大鼠模型。
　　 2.高氧組大體病理分級和肺損傷病理評分結果均提示肺損傷較空氣組及空氣加蛋白酶體抑制劑組嚴重(均P<0.01)；而高氧加蛋白酶體抑制劑組大體病理分級和肺損傷病理評分結果提示肺損傷較高氧組減輕(均P<0.01)。

5、>　　 3.高氧組泛素化蛋白的表達較空氣組強，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，高氧加蛋白酶體抑制劑組泛素化蛋白的表達與高氧組比較更強，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 4.高氧組凋亡指數與空氣組及空氣加蛋白酶體抑制劑組相比，明顯增高，有統(tǒng)計學意義(均P<0.01)。高氧加蛋白酶體抑制劑組與高氧組相比，凋亡指數，明顯降低，有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　 5.凋亡調控蛋白及途徑的檢測：P38蛋白的表達在空氣

6、組中較弱，在高氧組中表達較強，與空氣組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，但高氧加蛋白酶體抑制劑組P38蛋白的表達與高氧組比較明顯減少，與高氧組相比有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。Bcl-2與Bax蛋白在高氧組的表達都高于空氣對照組，差異有統(tǒng)計學意義(PBcl-2<0.05，PBax<0.01)。高氧組中Bax蛋白表達要高于高氧加蛋白酶體抑制劑組(P<0.01)，但Bcl-2蛋白的表達卻低于高氧加蛋白酶體抑制劑組(P<0.05)。Bcl

7、-2/Bax比值高氧加蛋白酶體抑制劑組比其他組高(均P<0.01)。在各檢測指標中，空氣組和空氣加蛋白酶體抑制劑組相比，差異均無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。
　　 結論：
　　 1.高氧暴露72小時大鼠肺臟有明顯損傷。
　　 2.高氧暴露早期激活了泛素蛋白酶途徑，其參與了肺損傷病理生理過程。
　　 3.蛋白酶體抑制劑MG-132可能通過Bcl-2/Bax蛋白和P38 MAPK通路而抑制細胞凋亡，從而減輕