職業(yè)緊張和TNF-α基因多態(tài)性與血清TNF-α水平關系的研究.pdf

1、背景與目的:在當今社會,人們的工作節(jié)奏加快、交往擴大、競爭加劇、壓力加大,職業(yè)中的應激現(xiàn)象越來越突出。雖然職業(yè)緊張不象生物、物理或化學因素那樣可造成特定的職業(yè)病,但卻可以以非特異性的方式來損害身體健康,過度應激會導致疲乏、焦慮、壓抑、免疫功能變化和工作能力下降等,甚至誘發(fā)疾病。根據(jù)現(xiàn)代緊張理論,下丘腦—垂體—腎上腺(hypothalamic-pituitary-adrenocorticalaxis,HPA axis)系統(tǒng)是應激影響免疫系

2、統(tǒng)機制中的一個重要組成部分,其激活的程度取決于許多因素且存在明顯的個體差異,個體對應激事件的應對能力起著決定性作用。目前已有的實驗證實,應激反應中,巨噬細胞和單核細胞可被激活而釋放前炎癥細胞因子,主要的前炎癥細胞因子有白細胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF),它們不僅本身可以調節(jié)免疫,而且還可以作用于

3、腦,誘發(fā)HPA軸的激活,進而影響機體的免疫功能。隨著細胞分子生物學的深入發(fā)展,從遺傳的角度來探討個體對應激反應的差異,使職業(yè)緊張易感性的研究從行為水平深入到分子水平已成為必然趨勢。由于這種遺傳背景的差異可能會涉及到眾多的遺傳因素,是一種多基因綜合作用的結果,而國內外對于此尚未見任何報道,在目前情況下,只能從與神經(jīng)一免疫系統(tǒng)關系最為密切的3種細胞因子展開研究。單核苷酸多態(tài)性是人類DNA變異中最常見的形式,約占其90％,被認為是最有價值的遺

4、傳標記。本文通過對大量文獻的歸納分析,初步篩選出TNF-A基因-308位點和-238位點,旨在了解TNF-A基因-308位點和-238位點G/A單核苷酸多態(tài)性在職業(yè)緊張引起TNF-α水平變化中所起的作用,以TNF-α為指標,來探討職業(yè)緊張與機體免疫功能的關系。
　　研究對象與方法：研究對象采用整群抽樣的方法抽取河南省某電器廠流水線作業(yè)工人178名進行問卷調查,實際回收有效問卷166份,其中男性123份,女性43份,樣本有效回收率9

5、3.3%,使用職業(yè)緊張測試量表(包括緊張因素量表、緊張反應量表、個性特征量表、緊張緩解因素量表)測試其職業(yè)緊張因素、緊張反應、個性特征和緊張緩解因素,以付出-回報失衡(effort-reward imbalance model,ERI)評價職業(yè)緊張水平〔ERI=付出/(回報×0.5454)〕,按ERI比值的上四分位數(shù)為界限,低于此界限的為低緊張組,其余為高緊張組。研究方法:1問卷調查每位研究對象均接收問卷調查,內容包括:一般情況調查、健

6、康檢查、職業(yè)緊張因素測評、相關職業(yè)緊張反應測評、個性特征測評、緊張緩解因素測評等。2實驗室檢測首先進行血樣采集:全部研究對象抽取清晨空腹肘靜脈血5ml,抽血后迅速打入含有肝素的一次性真空抗凝管中,震蕩混勻、分裝。一部分進行血清分離后置于-4℃冰盒中運回,進行TNF-α的檢測,另一部分直接運回置于-40℃冰箱準備分子生物學研究。2.1 TNF-α—308位點和—238位點基因多態(tài)性檢測(1)DNA提取采用DNA提取試劑盒提取DNA。(2)

7、PCR-RFLP通過DNA聚合酶鏈反應對包含TNF-α—308和—238多態(tài)性位點的2條DNA片段進行擴增,限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析技術鑒定其基因型。2.2血清TNF-α濃度的檢測采用放射免疫法測血清中TNF-α濃度,實驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行。3.統(tǒng)計學分析應用Excel2000對全部調查和測定結果建立數(shù)據(jù)庫,SPSS12.0軟件包進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。檢驗水準α=0.05(雙側)。
　　結果:1以文化程

8、度作為協(xié)變量的協(xié)方差分析結果表明,內控性工作心理控制源對血清TNF-α濃度有影響(P=0.021)、內驅力對血清TNF-α濃度亦有影響(P=0.016),且與文化程度無關,結果也顯示,內控性工作心理控制源評分越低血清TNF-α濃度越低,內驅力評分越低血清TNF-α濃度亦越低。Spearman相關分析顯示,血清TNF-α濃度與角色模糊(r=-0.167,P=0.035),決定自由度(r=-0.168,P=0.034)評分呈負相關,而與其他

9、職業(yè)緊張因素、緊張反應、個性特征和緊張緩解因素變量無相關關系(P>0.05),血清TNF-α濃度與性別(r=-0.183,P=0.021)、職稱(r=-0.225,P=0.009)、職業(yè)(r=-0.160,P=0.044)呈負相關,而與其他如年齡、婚姻狀態(tài)等無相關關系(P>0.05)。多元逐步回歸分析結果顯示,應付策略、角色模糊、心理需求/決定自由度和付出/回報失衡進入了回歸方程,是血清TNF-α濃度的預測因子。2 t檢驗結果表明,攜帶

10、A等位基因的工人中血清TNF-α濃度高于攜帶G等位基因的工人,但差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05),提示基因型對血清TNF-α濃度無影響。3卡方檢驗結果表明,兩個緊張組間TNF-α(—308)位點A等位基因型分布頻率差異無統(tǒng)計學意義(x~2=0.0001,P=1.0),提示該位點多態(tài)性與本研究對象職業(yè)緊張的遺傳易感性無關;TNF-α(—238)位點兩個緊張組間A等位基因型分布頻率差異有統(tǒng)計學意義(x~2=5.449,P=0.020),提示