Genistein與輻射聯(lián)合應(yīng)用于DU145前列腺癌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文Genistein與輻射聯(lián)合應(yīng)用于DU145前列腺癌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究姓名：嚴(yán)森祥申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：鄭樹(shù)森20040601浙江大學(xué)博k學(xué)位論文orWesternblotting)用于檢測(cè)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白包括周期素B1、cdc一2和p21“91的表達(dá)。結(jié)果通過(guò)分析各種濃度Genistein作用后DUl45細(xì)胞的克隆形成率，得出Genisteia作用于DUl45細(xì)胞的IC50約為30umol／L?？寺⌒?/p>

2、成試驗(yàn)進(jìn)一步顯示，Genistein在較低或中等濃度(5，15umol／L)下即可提高DUl45細(xì)胞的放射敏感性。單獨(dú)輻射和／或合用Genistein后24h，DNAladder提示細(xì)胞凋亡主要見(jiàn)于高濃度Genistein(J00“tool／L)處理組，72h后凋亡亦見(jiàn)于較低濃度Genistein組(30umol／L)。形態(tài)學(xué)：，TUNEL分析顯示凋亡細(xì)胞表現(xiàn)為紅色背景下的綠色或黃色熒光，且細(xì)胞形態(tài)相對(duì)較小，而DAPI染色辦呈現(xiàn)核濃縮、

3、核碎裂和凋亡小體形成等凋亡征象。Genistein單獨(dú)使用后可導(dǎo)致DUl45細(xì)胞G2／M期細(xì)胞周期阻滯，后者隨著Genistein作用濃度的增加而增加，f刊時(shí)伴之于G0／G1期或S期細(xì)胞的相應(yīng)減少；輻射(6Gy)亦能輕微增加G2／M期細(xì)胞；30“mol／L及以F濃度Genistein與輻射合用后能迸一步增加G2／M期細(xì)胞，但當(dāng)濃度上升罕100umol／L時(shí)，相對(duì)于單獨(dú)使用Genistein，Genistein合用輻射反而減少了G2／M期

4、細(xì)胞，同時(shí)伴有S期細(xì)胞的相應(yīng)增加；在30lamol／L濃度Genistein與輻射合用組，延長(zhǎng)觀察時(shí)間發(fā)現(xiàn)上述G2／M期細(xì)胞周期阻滯大部得到了維持，同時(shí)伴有凋亡和超二倍體細(xì)胞群的明顯增加。細(xì)胞周期相關(guān)蛋白分析提示，Genistein堆獨(dú)處理24h后，周期素B1暈現(xiàn)雙相變化，即起初隨著Genistein作用濃度的上升周期素B1逐漸增加，并在火約3()umol／L時(shí)達(dá)到峰值，100pmol／L時(shí)則繼而日月顯減少：?jiǎn)为?dú)輻射亦能顯著增加周期素B