嬰兒雙歧桿菌介導HSV-TK-GCV治療大鼠膀胱癌的實驗研究.pdf

1、目的:評價嬰兒雙歧桿菌(BI)介導單純皰疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)/更昔洛韋(GCV)自殺基因治療系統(tǒng)對SD大鼠膀胱癌的治療效果，探討其誘導大鼠膀胱癌組織細胞的凋亡及對大鼠膀胱癌組織Fas/FasL mRNA和蛋白表達的影響。
　　方法:
　　(1)構(gòu)建重組質(zhì)粒pGEX-TK。
　　(2)構(gòu)建嬰兒雙歧桿菌介導HSV-TK/GCV自殺基因治療系統(tǒng)。
　　(3) N-甲基亞硝基脲(MNU)膀胱灌注法誘導建立大鼠膀

2、胱腫瘤模型，并隨機分為生理鹽水/GCV對照組（生理鹽水組）、BI-pGEX-5X-1/GCV組（空質(zhì)粒組）和BI-pGEX-TK/GCV治療組（重組質(zhì)粒組）。分別將生理鹽水、BI-pGEX-5X-1、BI-pGEX-TK經(jīng)尾靜脈注射到各組荷瘤大鼠體內(nèi)，聯(lián)合腹腔注射GCV，療程共4周。
　　(4)治療4周后，稱取各組膀胱癌組織重量;TUNEL法檢測各組腫瘤組織凋亡;RT-PCR、蛋白質(zhì)印跡法(WB)檢測各組腫瘤組織Fas/FasL

3、mRNA及蛋白表達水平。
　　結(jié)果:
　　(1)成功構(gòu)建重組質(zhì)粒pGEX-TK。
　　(2)成功構(gòu)建嬰兒雙歧桿菌介導HSV-TK/GCV自殺基因治療系統(tǒng)。
　　(3)重組質(zhì)粒組荷瘤大鼠膀胱重量與空質(zhì)粒組及生理鹽水組相比明顯降低，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　(4) TUNEL法檢測發(fā)現(xiàn)各組均出現(xiàn)不同程度的腫瘤細胞凋亡，與空質(zhì)粒組及生理鹽水組相比，重組質(zhì)粒組凋亡最為顯著(P＜0.01)。
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