海馬AMPARs參與腸易激綜合征大鼠中樞敏化.pdf

1、目的：
　　探究海馬α-氨基-3-羥基-5-甲基4-異嗯唑丙酸受體（a-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionate receptor,AMPARs）在腸易激綜合征（Irritable bowel syndrome,IBS）慢性功能性內臟痛大鼠中樞敏化的作用及機制，以期揭示IBS慢性功能性內臟痛發(fā)病機制，為IBS慢性功能性內臟痛臨床防治及藥物研發(fā)提供新思路。
　　方法：

2、>　　新生SD大鼠出生后第3～21天，每天固定時間給予3小時母嬰分離心理應激，構建IBS慢性內臟痛模型，對照組大鼠除不行母嬰分離外，其他處理方式均與模型組一致。大鼠成年后（8周），通過檢測40和60 mmHg結直腸擴張刺激下腹外斜肌放電反應的方法評估模型成功與否，選痛覺敏化者進行實驗。經立體定位置管，海馬雙側微量注射不同劑量的AMPARs抑制劑CNQX（10、20、40 nmol，每側2μl），觀察比較給藥前后不同壓力下腹外斜肌放電反應

3、的差異及藥效持續(xù)時間。通過Western blot方法檢測比較正常和IBS大鼠海馬AMPARs亞型（GluR1，GluR2）的表達水平；應用離體腦片場電位記錄方法觀察 IBS大鼠海馬CA1區(qū)長時程增強（long-term potential,LTP）是否易化，并在高頻刺激60min后，取海馬腦片通過Western blot檢測其GluR1、GluR2的表達情況。
　　結果：
　　①IBS慢性功能性內臟痛大鼠內臟痛敏反應較正常

4、大鼠顯著增高。
　?、诤ｑR雙側微量注射AMPARs抑制劑CNQX可劑量依賴性抑制大鼠內臟痛敏反應，抑制作用在給藥后30min最強，可持續(xù)約90min。
　?、叟c對照組大鼠相比，IBS慢性功能性內臟痛大鼠AMPARs的亞型GluR2表達量顯著增高，然而GluR1的表達水平卻無明顯差異。
　?、躀BS慢性功能性內臟痛大鼠，高頻刺激誘導的海馬LTP與正常大鼠相比顯著增強。
　　⑤正常和IBS慢性功能性內臟痛大鼠離體腦片