螺旋藻的酶解利用研究.pdf

1、機體衰老可引起多種疾病，而自由基過剩被普遍認為是引起衰老的主要原因(如動脈粥樣硬化、心血管疾病、腦神經細胞變性及腫瘤等)。目前多數(shù)抗衰老藥物為化學合成藥品，有實踐證明:服用過多的合成藥物抗衰老會對人體產生毒副作用，因此，尋找天然抗氧化劑延緩衰老對人類健康具有重大意義。
　　藻類是一種含量豐富、分布廣泛的天然資源，含有大量營養(yǎng)價值極高的微量元素。在藻類中提取的抗氧化劑具有抗氧化作用強、種類豐富、副作用低等優(yōu)點，而且有研究表明螺旋藻和

2、藻膽蛋白具有抗氧化活性，能抑制機體內自由基積累，延緩機體衰老，抑制腫瘤的發(fā)生，并具有降血壓活性。另外國內外已有報道稱從不同藻類酶解液中得到具有明顯降血壓作用，抗氧化作用，抗增殖等能力的活性肽。因此合理開發(fā)和利用藻類并提高其應用價值具有廣泛的發(fā)展前景，對人類抗衰老工程具有極其重要的意義。本論文以鈍頂螺旋藻(Spirulina platensis)為研究對象，圍繞其高值化開發(fā)利用這一研究主題進行研究，結果如下:
　　螺旋藻為實驗室養(yǎng)殖

3、，將螺旋藻收集后清洗，與磷酸鹽緩沖液混合后經過反復凍融得到螺旋藻粗蛋白提取液，運用蛋白酶SM98011酶解螺旋藻粗蛋白粗提液得到抗氧化活性增強的產物，提高了螺旋藻的應用價值。酶解螺旋藻蛋白粗提液采用的反應體系為螺旋藻蛋白粗提液、蛋白酶SM98011、磷酸鹽緩沖液體系，在50℃下酶解5h后將蛋白酶滅活，離心后通過α-脫氧核糖法測定酶解產物清除自由基的能力為33.28％，較未酶解樣品的12.15％有明顯增強。另外將螺旋藻粗蛋白酶解液及未酶解

4、樣品在經過氨基水楊酸沉淀及鹽酸全水解后進行氨基酸分析，發(fā)現(xiàn)二者氨基酸組成有顯著差異。
　　通過凝膠過濾層析柱Sephadex G-15(1.6×80cm，medium Pharmacia)對酶解液進行初步分離，得到5個分離峰，經過對其抗氧化活性測定發(fā)現(xiàn)峰3具有較高的抗氧化活性，為26.82％。對峰3進行反復收集，凍干濃縮后由高壓液相色譜對酶解液中的抗氧化成分進行進一步分離純化，得到a-j十個分離峰，經測峰d抗氧化活性最高為:13.

5、42％。對峰d反復收集濃縮，利用質譜分析對其氨基酸序列組成進行了解析，初步得出抗氧化活性肽的氨基酸組成可能為LAHICGVP。
　　藻類蛋白資源是潛在的天然藥物與食品資源，而螺旋藻是其中研究較多的一種高價值藻類。關于螺旋藻的報道多體現(xiàn)在其降血壓活性以及其作為自然食品所具有的豐富營養(yǎng)，較少有關于從螺旋藻粗蛋白的酶解液中提取關于抗氧化活性的物質。本實驗從抗氧化出發(fā)，對螺旋藻粗蛋白酶解液的清除自由基能力進行了測定，為今后關于螺旋藻及其他