美滿霉素對多巴胺能神經(jīng)元保護機制的實驗研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文美滿霉素對多巴胺能神經(jīng)元保護機制的實驗研究姓名：沈偉申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：孫圣剛20060401華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院2003級博士學(xué)位論文第二部分美滿霉素抑制脂多糖誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細胞腫瘤壞死因子Q的表達目的在離體細胞培養(yǎng)中，探討MC對LPS誘導(dǎo)的BV一2細胞腫瘤壞死因子一a(TumornecrosiSfactor—o，TNF—a)表達的影響。方法將MC或LPS加入培養(yǎng)的BV一2細胞中，使用酶聯(lián)

2、免疫吸附試驗(Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)、免疫組織化學(xué)方法觀察BV一2細胞中TNF—o蛋白的表達，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)檢測細胞TNF—omRNA表達。結(jié)果LPS(100ng／m1)組BV2細胞培養(yǎng)上清中的TNF一Ⅱ含量顯著升高(P(O01)、細胞中TNF—Q蛋白和mRNA的表達也顯著升高(均P(O01)，高于空白對照組。MC(10肚mol／L)預(yù)處理可明顯抑制上述變化。MCLPS組BV一2

3、細胞培養(yǎng)上清中TNF—o含量較LPS組顯著下降(PO05)。MCLPS組BV一2細胞中TNF—a蛋白、mRNA的表達較LPS組顯著下降(均P(O01)，但仍顯著高于空白對照組(均P(O05)。結(jié)論MC預(yù)處理可顯著抑制LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細胞TNF—n的表達。聯(lián)鍵詞1美滿霉茲叫‘2≯朋旨擘刊、膠紫脅腫瘤壞死因子。。第三部分美滿霉素下調(diào)P38MAPK的表達抑制脂多糖誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細胞的活化目的在離體細胞培養(yǎng)中，探討Mc抑制LPS誘導(dǎo)的BV一2細

4、胞活化與P38MAPK信號傳導(dǎo)途徑的關(guān)系。方法將MC或LP$加入培養(yǎng)的BV一2細胞中，利用Western免疫印跡法觀察BV2細胞P38絲裂原活化蛋白激酶(Mitogen—activatedproteinkinase，P38MAPK)表達的變化。結(jié)果實驗各組BV一2細胞P38MAPK總蛋白水平無變化；空白對照組、MC組幾乎無磷酸化P38MAPK(PPMAPK)蛋白的表達；LPS組pPMAPK蛋白表達水平顯著上調(diào)，與空白對照組有顯著差異(P