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文檔簡介
1、目的:急性壞死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)病情兇險,病程發(fā)展快,病死率高,其病程中常出現(xiàn)全身性炎癥反應綜合征、嚴重感染、感染性休克及多器官功能障礙綜合征(multipieorgan dysfunction syndrome,MODS),導致死亡。近年來隨著對其發(fā)病機制研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)巨噬細胞在ANP中起重要的作用。本研究旨在探討氯膦酸二鈉脂質(zhì)體(liposomal clodrona
2、te,LC)對ANP大鼠枯否細胞(Kupffer cell,KC)凋亡的作用。
方法:采用薄膜法制備LC;經(jīng)大鼠胰腺被膜下均勻注射5%?;悄懰徕c4ml/kg制作ANP模型,分離培養(yǎng)ANP大鼠Kupffer細胞,加入不同體積的Clodronate旨質(zhì)體(50μl、100μl、150μl)進行干預,然后分別采用MTT法,流式細胞術和DNA瓊脂糖凝膠電泳技術檢測KC增殖、凋亡情況。
結果:所制備的脂質(zhì)體直徑100-
3、200nm,Clodronate包裹率為(5.8%),透射電鏡檢查見其大小均勻。獲得的KC形態(tài)正常,經(jīng)瑞氏染色法鑒定純度>90%,臺盼藍染色,細胞存活率>95%。在三種不同體積的LC干預24小時后,KC的抑制率分別為17.4%,24.2%和31.1%:流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn),在三種不同體積LC干預下,KC凋亡率分別為(14.12±0.37)%,(18.74±0.43)%和(27.51±0.39)%,差異均有顯著性(P<0.01);經(jīng)1.2%
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