環(huán)境因素對缺氧缺血性腦損傷新生鼠學習記憶及神經(jīng)可塑性的影響.pdf

1、背景與目的：缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemicbraindamage，HIBD)嚴重威脅新生兒生命并易造成兒童永久傷殘，至今缺乏理想有效的防治辦法。對成年腦損傷動物模型的研究已證實，豐富環(huán)境能增強神經(jīng)可塑性，改善腦功能，促進腦損傷修復，貧瘠環(huán)境的作用則與之相反。而不同環(huán)境因素對發(fā)育期腦損傷的作用及機制目前尚不清楚。為此，本實驗擬觀察不同環(huán)境因素對HIBD新生鼠學習記憶及神經(jīng)可塑性的影響，探討可能的神經(jīng)機制，旨在為臨床應用

2、豐富環(huán)境治療新生兒HIBD提供基礎理論支持和指導。 方法：采用Rice法建立7日齡(postnatalday7，P7)Sprague-Dawley(SD)新生大鼠HIBD模型，隨機分為三組：豐富環(huán)境(enrichedenvironment，EE)組、貧瘠環(huán)境(impoverishedenvironment，IE)組和標準環(huán)境(standardenvironment，SE)組，另設假手術(Sham-operation，Sham)組

3、。于建模后第2d分別進行不同環(huán)境干預，干預28d后，應用Morris水迷宮測試大鼠學習記憶能力，測量體重和腦重，HE染色觀察左側海馬病理形態(tài)學改變，尼氏染色計數(shù)左側海馬存活神經(jīng)元數(shù)目，免疫組織化學法檢測左側海馬生長相關蛋白(growth-associatedprotein-43，GAP-43)灰度值和巢蛋白(nestin)陽性細胞數(shù)，RT-PCR法檢測左側海馬GAP-43mRNA和nestinmRNA光密度比值。 結果：

4、 1.在Morris水迷宮的定位航行和空間探索實驗中，EE組成績明顯優(yōu)于SE組和IE組(P＜0.001)，與Sham組差異不明顯(P＞0.05)，而SE組則優(yōu)于IE組(P＜0.01)。2.在體重上，EE組明顯高于SE組(P＜0.05)和IE組(P＜0.01)，與Sham組差異不明顯(P＞0.05)，而SE組則高于IE組(P＜0.05)。在腦重上，EE組高于SE組(P＜0.01)和IE組(P＜0.001)，但低于Sham組(P＜0.05)

5、，SE組高于IE組，低于Sham組，差異顯著(P＜0.01)。 3.HE染色見Sham組左側海馬無異常，EE組左側海馬輕度異常，如神經(jīng)元排列稍紊亂、少量細胞丟失等，SE組和IE組左側海馬明顯異常，細胞層數(shù)減少，神經(jīng)元排列散亂、稀疏，細胞間隙增大，脫失明顯，核仁不清，可見核固縮、核碎裂。 4.神經(jīng)元尼氏染色計數(shù)顯示，EE組左側海馬神經(jīng)元存活數(shù)目多于SE組(P＜0.05)和IE組(P＜0.01)，與Sham組差異不明顯(P＞

6、0.05)，SE組低于Sham組(P＜0.01)，多于IE組(P＜0.05)。 5.免疫組織化學染色結果顯示，EE組左側海馬GAP-43和nestin表達強于SE組和IE組(P＜0.05)，SE組又強于IE組和Sham組(P＜0.05)。 6.RT-PCR檢測結果顯示，EE組左側海馬GAP-43mRNA表達強于SE組和IE組(P＜0.01)，SE組又強于IE組和Sham組(P＜0.05)。nestinmRNA表達EE組強

7、于SE組(P＜0.05)和IE組(P＜0.01)，SE組又強于IE組和Sham組(P＜0.01)。 結論： 1.與SE組HIBD鼠相比，EE組HIBD鼠體重和腦重的增長明顯，海馬病理損害減輕，學習記憶能力增強，提示EE有利于腦損傷修復； 2.與SE組HIBD鼠相比，IE組HIBD鼠體重和腦重的增長緩慢，海馬病理損害重，學習記憶能力明顯下降，提示IE不利于腦損傷修復； 3.與SE組HIBD鼠相比，EE組病側