脈沖電磁場對去勢大鼠骨代謝影響的實驗研究.pdf

1、研究目的:PEMF在體外對成骨細胞一破骨細胞體系的作用及其機理,探討PEMF對發(fā)生骨質(zhì)疏松的去勢大鼠骨的生物學作用,為臨床應用PEMF治療和預防骨質(zhì)疏松提供實驗依據(jù).材料與方法:1.應用形態(tài)學、特異性酶染色及免疫細胞化學技術(shù),對培養(yǎng)的成骨細胞及破骨細胞進行鑒定.2.應用對硝基苯酚法測定在PEMF作用后的成骨細胞-破骨細胞共育體系中成骨細胞堿性磷酸酶活性(ALPase);應用流式細胞儀技術(shù)檢測PEMF對成骨細胞周期及細胞凋亡的影響;應用圖

2、象分析技術(shù)分析PEMF對成骨細胞礦化功能的影響.3.通過熒光標記,應用流式細胞儀檢測PEMF對成骨細胞細胞膜電位及細胞內(nèi)鈣離子濃度的影響.4.通過H-E染色、四環(huán)素標記和Ⅰ型膠原SABC法免疫組化技術(shù)分析處理組和對照組組織學的改變;通過圖象重組分析技術(shù)檢測各組骨小梁空間結(jié)構(gòu)的變化.5.通過骨密度儀檢測各組骨密度的變化;通過生物力學測試儀檢測各組生物力學的變化.6.統(tǒng)計分析:采用SPSS 10.0 軟件包.計量資料,采用配對t檢驗及方差分

3、析檢驗各組間差異的顯著性,組間比較用LSD方法;計數(shù)資料,卡方檢驗.結(jié)論:1.在一定頻率和強度PEMF的作用下,成骨細胞DNA合成增加,細胞增殖加快,合成和分泌細胞外有機質(zhì)功能增加,后者與細胞外鈣等無機質(zhì)結(jié)合,從而促進鈣化結(jié)節(jié)的形成.2.PEMF通過作用于成骨細胞膜上的鈉通道,使得細胞內(nèi)鈉離子內(nèi)流而出現(xiàn)去極化,當去極化達到一定的水平時,細胞膜上的電壓依賴型鈣離子通道開放,從而細胞外鈣離子得以向細胞內(nèi)內(nèi)流,最終表現(xiàn)為細胞內(nèi)鈣離子濃度升高,