體外誘導(dǎo)大鼠基質(zhì)干細胞成軟骨細胞的基因表達譜研究.pdf

1、目的:以形態(tài)學、免疫組化、原位雜交和RT-PCR等技術(shù)確定的不同誘導(dǎo)劑或誘導(dǎo)劑組合誘導(dǎo)MSCs向成軟骨等方向分化的結(jié)果為條件,對不同誘導(dǎo)劑或誘導(dǎo)劑組合、不同培養(yǎng)和傳代時間MSCs向軟骨細胞系分化過程中的基因表達譜進行測定,以未加任何誘導(dǎo)劑的MSCs傳代培養(yǎng)組作為對照,對各組基因表達進行差異分析、比較,探討誘導(dǎo)MSCs向成軟骨分化的最佳條件及MSCs向成軟骨分化的分子機制,以期發(fā)現(xiàn)促進、抑制或一過性基因表達在誘導(dǎo)MSCs向成軟骨分化中的作

2、用.結(jié)論:應(yīng)用免疫組化、原位雜交和RT-PCR檢測結(jié)果表明單獨應(yīng)用DEX不具備誘導(dǎo)MSCs向軟骨細胞系分化的能力.TGF-β<,1>表達Ⅱ型膠原的能力較強,但增殖力較DEX組要弱,表明了TGF-β<,1>在誘導(dǎo)MSCs向軟骨細胞系分化的方向性.TGF-β<,1>和DEX聯(lián)合誘導(dǎo)Ⅱ型膠原的表達最高且保持了良好的增殖能力.提示MSCs的增殖和分化并不是兩個獨立的過程,兩著之間存在著相互影響.應(yīng)用基因表達譜的研究結(jié)果表明,TGF-β<,1>和

3、DEX聯(lián)合誘導(dǎo)只有前膠原Ⅱα1和聚合素的高表達而沒有軟骨細胞前膠原Ⅱβ、膠原Ⅸα1、膠原Ⅺα2的表達,也沒有Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原和Ⅹ型膠原的表達,提示大鼠基質(zhì)干細胞向軟骨細胞生活費分化過程中,首先分化為軟骨細胞的祖細胞或前體細胞.單獨應(yīng)用TGF-β或TGF-β和DEX共同處理大鼠基質(zhì)細胞能使這些干細胞向軟骨細胞系分化.應(yīng)用TGF-β和適當劑量的地塞米松處理大鼠基質(zhì)干細胞,比單獨應(yīng)用TGF-β更有利于使大鼠基質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化.單獨應(yīng)用