C225聯(lián)合多西他賽在人胃癌細(xì)胞株MGC803及BGC823中的體外研究.pdf

1、目的： 1、通過(guò)體外觀察C225及與細(xì)胞毒性藥物多西他賽聯(lián)合對(duì)胃癌細(xì)胞株MGC803和BGC823增殖的影響，評(píng)估藥物聯(lián)合效應(yīng)并探討最佳聯(lián)合方案。 2、通過(guò)觀察C225及與多西他賽聯(lián)合對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)周期的影響及相關(guān)蛋白表達(dá)的變化，探討最佳聯(lián)合順序方案的作用機(jī)理。 方法： 將MGC803及BGC823人胃癌細(xì)胞株于37℃、5％CO2條件下進(jìn)行培養(yǎng)。1、待細(xì)胞呈對(duì)數(shù)生長(zhǎng)，接種于96孔培養(yǎng)板，設(shè)空白對(duì)照組、C2

2、25組、多西他賽組及C225+多西他賽聯(lián)合組，經(jīng)不同給藥濃度及順序處理后應(yīng)用MTT法檢測(cè)C225及與多西他賽聯(lián)用對(duì)細(xì)胞增殖的影響，并計(jì)算兩藥聯(lián)合效應(yīng)，找出最佳聯(lián)合給藥順序：2、將細(xì)胞接種于6孔板，設(shè)置空白對(duì)照組、C225組及最佳的聯(lián)合給藥濃度及順序處理組，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡周期。3、以Western-Blotting蛋白免疫印記法，分析最佳的聯(lián)合給藥濃度及順序處理前后EGFR及其下游分子p-38MAPK、p-AKT表達(dá)的變化情況

3、。 結(jié)果： 1、MTT比色結(jié)果顯示：C225單藥作用，隨著給藥濃度從0.1ug/ml-1000ug/ml遞增，其對(duì)人胃癌MGC803及BGC823細(xì)胞株的抑制作用呈現(xiàn)逐漸增強(qiáng)的趨勢(shì)，但未顯出明顯的量-效關(guān)系；多西他賽單獨(dú)作用對(duì)人胃癌MGC803及BGC823細(xì)胞株的抑制呈明顯量-效關(guān)系；C225與多西他賽聯(lián)合作用時(shí)，能在一定程度上增加多西他賽的腫瘤抑制作用；多西他賽先于C225給藥的序貫給藥優(yōu)于其它給藥順序。 2

4、、流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果提示：C225誘導(dǎo)人胃癌MGC803及BGC823細(xì)胞株G0/G1期阻滯，S期的細(xì)胞比例減少，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。 3、Western-Blotting檢測(cè)結(jié)果顯示：C225與多西他賽序貫聯(lián)合作用時(shí)，能下調(diào)人胃MGC803及BGC823細(xì)胞株EGFR信號(hào)通路相關(guān)蛋白p-38MAPK、p-AKT的表達(dá)從而達(dá)到抑制細(xì)胞增殖作用。 結(jié)論： 1、C225與多西他賽聯(lián)合作用時(shí)，在一定程度上可增強(qiáng)其對(duì)

5、人胃癌MGC803、BGC823細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)；多西他賽先于C225給藥的序貫給藥順序優(yōu)于其他聯(lián)合順序。 2、C225 與多西他賽序貫順序作用的機(jī)制可能為：多西他賽可上調(diào)EGFR表達(dá)水平，增強(qiáng)C225對(duì)EGFR信號(hào)傳導(dǎo)通路及其通路下游的相關(guān)蛋白p-38MAPK、p-AKT的表達(dá)的抑制，進(jìn)而抑制細(xì)胞增殖，增加細(xì)胞G0/G1期阻滯，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。 3、C225在人胃癌細(xì)胞中的研究為C225單獨(dú)或與其他細(xì)胞毒性藥物聯(lián)合用于