血液抗-HCV抗體篩查的質(zhì)量控制系統(tǒng)研究.pdf

1、首先我們建立了大量血液標(biāo)本HCV-RNA檢測(cè)的RT-nPCR方法,內(nèi)外兩對(duì)引物序列采用HCV基因組中最為保守的5’-NCR區(qū).為減少大量陽(yáng)性標(biāo)本之間的交叉污染,HCV-RNA的提取采用Roche公司的病毒RNA提取試劑盒,并在檢測(cè)系統(tǒng)中引入HCV-RNA的陰性、陽(yáng)性、弱陽(yáng)性對(duì)照,以判定每次實(shí)驗(yàn)是否成立.由于標(biāo)本量大,我們將PCR循環(huán)中退火與延伸兩步合并為一步,以縮短反應(yīng)時(shí)間.同時(shí)對(duì)Chiron公司的RIBA和Genelabs公司的WB兩

2、種補(bǔ)充確認(rèn)試劑做對(duì)比分析,選用了Chiron公司的RIBA用于該課題的抗體確認(rèn)研究.通過該課題的研究,了解到獻(xiàn)血人群中HCV感染者多是無癥狀攜帶者且抗體譜呈多樣化分布,尤其是從確證單片段陽(yáng)性血液中檢出HCV-RNA.提示預(yù)防經(jīng)血傳播HCV血液篩查應(yīng)從多方面考慮,HCV-Ab EIA檢測(cè)應(yīng)高度靈敏,報(bào)廢血的產(chǎn)生是必然的.最后,為了能夠更好的執(zhí)行衛(wèi)生部關(guān)于兩次檢測(cè)的血液篩查模式,我們依據(jù)第二部分對(duì)獻(xiàn)血人群HCV感染者的感染狀態(tài)的分析結(jié)果及參