紫杉醇誘導人骨肉瘤細胞凋亡及其對Bcl-2、Bax基因表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、上海交通大學博士后士學位論文紫杉醇誘導人骨肉瘤細胞凋亡及其對Bcl2、Bax基因表達的影響姓名：張春林申請學位級別：博士后士專業(yè)：臨床醫(yī)學指導教師：曾炳芳20040601ABSTRACTBackgroundPac]itaxelisamicrotubule[nhibitoritsactionresultsintheformationofstablebund]esofmicrotubuleswithinthecell，increasestu

2、bulinpclymerizationinhibitstheformationofmitoticspindleandcellcycleandfinallyinducesthecellapoptosisIthasbeendentonstratedthatpacIitaxelcaninduceapoptosisinseveralcancers(suchasovarianandbreastcanceraswellas1eukemia)Howe

3、veritisnotclearhowpaclitaxelinducesapoptosisinhumanosteosarcomaandwhethertheapoptosisisrelatedtoapoptosis—regulatedgeneBcl一2andBaxObjectiveToinvestigatethemechanismthatpacIitaxelinducestheapoptosisinhumanosteosarcomaceil

4、s。andtodetecttherelationshipbetweencellapoptosisandexpressionofBcl一2andBaxsoastoprovideevideneesfortheclinicalapplicationofpaclitaxelMethodsMG63osteosarcomacellsweretreatedwithpaclitaxelofvatiousconcentrationsPI‘01iferat

5、ionwasdetermfnedbycellCOURtinacytometerchamberViabilitywasassessedbytypanbluedyeexclusionThecellmorphologicalterationswerevisualizedusingiightandtransmittingelectronmicroscopeThepercentageofapoptosisofMG63osteosarcomacel

6、lsWaSmeasuredbyTdT—mediateddUTPNickEndLabelingtechnique(TUNEL)stainingmethodandflowcytometryusingAnnexinV／PIdoublestainingmethodafter0，24，48，72and96hoursofcultureinthepresenceorabsenceofpaclitaxelTheexpressionofapoptosis

7、—regulatedgeneBcl一2andBaxweredetectedusingimmunohistochemicalstainingmethodsResultsAtime—dependentanddose—dependentcellgrowthinhibitionwasshownafterexposuretopac“taxelPacIitaxelinducedMG63cellstoundergoapoptosiswithtypic

8、alapoptosischaracteristics，includingmorphologicalchangesofchromatincondensation，chromatincrescentformation，nucleusfragmentationTheONA—cleavageandapoptosisweredetectedbyTUNELassayTheeellstreatedwithpaclitaxelshowedinitial

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