小兒急性白血病BcL-2基因、BAX基因表達(dá)及臨床意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文小兒急性白血病BcL2基因、BAX基因表達(dá)及臨床意義姓名：何莉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：郭承吉2000.4.15歲一10歲。二.實(shí)驗(yàn)儀器和試劑主要試劑及儀器:Ficol淋巴細(xì)胞分離液購于上海試劑二廠Trizol購于GIBCOBRLUSA反轉(zhuǎn)錄試劑盒購于上海Sangon公司TaqDNA聚合酶dNTP購于大連TAKARA公司德國PCR擴(kuò)增儀等。引物由上海Sangon公司合成。實(shí)驗(yàn)方法一標(biāo)本采集:于化療前

2、采集肝素抗凝骨髓2mlo二.骨髓中分離單個(gè)核細(xì)胞:采用Ficol密度梯度離心分離單個(gè)核細(xì)胞。三.RT一PCR方法檢測BcL一2基因、BAX基因表達(dá):按照Trizol試劑盒說明提取總RNA，按逆轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA第一鏈后PCR擴(kuò)增。3種基因的cDNA引物序列分別為:BcL2引物序列，上游引物5’一GGATGTGGCCTTCTTGAG一3下游引物5一CCAAACTGAGCAGAGTCTTC一3產(chǎn)物233bpBAX引物序列，上游引物5’一

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