水稻內(nèi)生拮抗細(xì)菌抗菌蛋白的提取、抗生作用及理化特性.pdf

1、水稻內(nèi)生拮抗細(xì)菌一枯草芽孢桿菌 [Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn]G87是本實(shí)驗(yàn)室從水稻根內(nèi)分離獲得的，其培養(yǎng)濾液以60％硫酸銨沉淀和透析(透析袋截留分子量8000～10000Da)，獲得抗菌粗蛋白。用紫外線吸收法測(cè)得G87培養(yǎng)濾液中粗蛋白含量為3.52mg/ml。該粗蛋白經(jīng)SephadexG-50凝膠柱層析后，洗脫峰I具有抑菌活性。SDS-PAG_E電泳和考馬斯亮藍(lán)染色及銀染顯示，洗脫峰I蛋白含有多種

2、組分，其中經(jīng)考馬斯亮藍(lán)染色，峰I可分出2條帶，分子量分別為35.946kD和59.954kD；根據(jù)銀染結(jié)果，峰I有7條帶，分子量范圍為25.046kD～82.799kD。由于這些蛋白帶未作進(jìn)一步的分離純化和抗菌活性測(cè)定，因此，抗菌蛋白的組分及其分子量尚待進(jìn)一步確定。 G87粗蛋白對(duì)稻惡苗病菌 (Gibberella fkuroi)和稻瘟病菌 (Magnaporthegrisea)的菌絲生長(zhǎng)、分生孢子萌發(fā)及芽管伸長(zhǎng)均具有顯著的抑制

3、作用。從總體來(lái)看，抗菌蛋白對(duì)稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制要比對(duì)稻惡苗病菌強(qiáng)，當(dāng)濃度為1.20mg/ml時(shí)，抗菌蛋白對(duì)稻瘟病菌菌落直徑和菌絲干重的抑制率分別達(dá)60％和80％以上。但是，抗菌蛋白對(duì)稻惡苗病菌分生孢子萌發(fā)與芽管伸長(zhǎng)的抑制要強(qiáng)于對(duì)稻瘟病菌，當(dāng)濃度為2.40mg/ml時(shí)，抗菌蛋白對(duì)稻惡苗病菌分生孢子萌發(fā)與芽管伸長(zhǎng)的抑制率均達(dá)60％以上。此外，抗菌蛋白對(duì)兩種病菌菌絲形態(tài)都有明顯的破壞作用，其主要表現(xiàn)在病菌菌絲細(xì)胞畸形膨大、菌絲扭曲變形、原