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文檔簡介
1、目的:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種自身免疫系統(tǒng)疾病,其發(fā)病機制尚不清楚,但一般認(rèn)為此疾病存在T細胞數(shù)量與功能異常。在對CD48、CD244分子功能的研究中發(fā)現(xiàn),CD48/CD244相互作用可調(diào)節(jié)T細胞的增殖與效應(yīng)功能。本實驗將通過流式細胞儀的檢測方法,對狼瘡性腎炎(LN)患者外周血T淋巴細胞表面CD48、CD244分子表達情況進行檢測,以期在分子水平上探明CD48、CD244在T細胞上的變化情況與狼瘡性腎炎發(fā)病的相關(guān)性。 材料
2、和方法1.實驗試劑、材料和儀器。 PE熒光標(biāo)記鼠抗人CD3單克隆抗體,PerCP熒光標(biāo)記鼠抗人CD8單克隆抗體,F(xiàn)ITC熒光標(biāo)記鼠抗人CD48單克隆抗體,F(xiàn)ITC鼠抗人CD244單克隆抗體,紅細胞裂解液,F(xiàn)ACScan型流式細胞儀,低溫離心機,恒溫水浴循環(huán)儀。 2.研究對象符合1982年美國風(fēng)濕病協(xié)會制定的判斷標(biāo)準(zhǔn)確診為SLE且伴腎炎表現(xiàn)者25例,其中活動期19例,穩(wěn)定期6例。正常對照15例,均為健康獻血員。 3
3、.臨床及實驗資料:來源于我院病例記載和實驗測得結(jié)果。 4.實驗方法:4.1標(biāo)本采集。 4.2抗原抗體反應(yīng)。 4.3將標(biāo)本制作為淋巴細胞懸液。 4.4通過流式細胞儀進行檢測。 4.5應(yīng)用CellQuesPlot軟件進行數(shù)據(jù)分析。 5.統(tǒng)計分析采用SPSS軟件。 結(jié)果LN病例活動組CD4+T細胞百分?jǐn)?shù)較正常對照組明顯降低(P<0.05),LN病例未活動組CD4+T細胞百分?jǐn)?shù)也降低,但與
4、正常對照組比較無顯著差異(P>0.05)。LN病例活動組與未活動組CD8+T細胞百分?jǐn)?shù)均較正常對照組明顯升高(P<0.05),活動組更明顯。LN病例活動組與未活動組CD4/CD8比值均較正常對照組明顯降低(P<0.05)。 LN病例活動組CD48在CD8+T細胞表面的表達顯著低于正常對照組(P<0.05),未活動組CD48在CD8+T細胞表面的表達與正常對照組無顯著差異(P>0.05),CD8+T細胞表面CD48平均熒光強度與S
5、LEDAI評分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.63,P<0.01)。 CD244在CD8+T細胞表面的表達在LN病例組、對照組及LN病例組各亞組之間無明顯差別(P>0.05)。CD8+T細胞表面CD244平均熒光強度與SLEDAI評分無相關(guān)性(P>0.1)。 CD48、CD244在CD4+T細胞表面的表達在LN病例組、對照組及LN病例組各亞組之間無明顯差別(P>0.05)。CD4+T細胞表面CD48、CD244平均熒光強度與SLED
6、AI評分無相關(guān)性(P>0.1)。 結(jié)論1.LN病例活動組CD4+T細胞的百分率顯著下降,未活動組CD4+T細胞的百分率也降低,但與正常對照組比較無統(tǒng)計學(xué)意義。 2.LN病例組CD8+T細胞的百分率升高,活動期更明顯。 3.LN病例組CD4/CD8比值明顯下降,隨著病情穩(wěn)定,CD4/CD8比值呈上升趨勢。 4.LN病例活動組CD48在CD8+T細胞表面的表達顯著低于正常對照組與未活動組,且LN病例組CD8+
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