干細胞因子對糖尿病小鼠結腸Cajal間質細胞的影響.pdf

1、糖尿病(diabetes mellitus，DM)患者中，胃腸動力障礙的發(fā)病率為25％-76％，包括胃輕癱、便秘與腹瀉等，影響患者的生活質量與血糖控制，機制尚不完全清楚。Cajal間質細胞(interstitial cells ofCajal，ICC)是胃腸運動的起搏細胞，且介導神經遞質的產生和作用。研究發(fā)現，DM胃腸動力障礙與胃腸道ICC的異常改變有關；干細胞因子(stem cell factor，SCF)是ICC特異性標志物c-Ki

2、t(酪氨酸激酶受體)的天然配基，SCF/Kit信號對ICC的表型維持、增殖分化等有重要作用，而SCF-Kit信號對ICC胚胎期或成熟后發(fā)育的重要性尚存在分歧。本研究將探討SCF與DM小鼠結腸ICC異常改變的關系，為尋找該病新的治療方法提供理論依據。 [目的] 1.探討DM小鼠結腸SCF及ICC的變化關系。 2.探討SCF對小鼠結腸ICC的影響。 3.觀察外源性SCF對DM小鼠結腸ICC病變的作用。

3、 【方法】 1.建立DM小鼠模型、分組及干預：C57/BL6小鼠SPF環(huán)境飼養(yǎng)，予一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(150mg/kg)建立DM小鼠模型，DM鼠成模后分為：①正常對照組(N，n=10)，②DM組(DM，n=10)，以上2組均予磷酸鹽緩沖液(PH=7.4)，隔日腹腔注射×6周；③正常+anti-SCF組(N+anti-SCF，n=10)：予anti-SCF(1mg/kg)隔日腹腔注射×6周；④DM+SCF組(DM+SCF，n

4、=10)：予SCF(0.2ug/kg)每日腹腔注射×6周。監(jiān)測體重、血糖。干預結束并休息3天后，處死所有小鼠。 2.留取所有小鼠近、遠端結腸組織，Western-blot檢測結腸組織中SCF蛋白的表達情況；留取所有小鼠血清，ELISA法檢測血清中可溶型SCF濃度。 3.用流式細胞儀檢測組織中ICC的數量比例；透射電鏡觀察小鼠結腸組織中ICC的超微結構；免疫組化標記結腸組織c-Kit(ICC的特異性受體)陽性細胞；West