發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露對大鼠腦海馬、大腦皮質mGluR5和Homer-1b-c表達和學習記憶的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:鉛是具有神經毒性的重金屬元素。低濃度的鉛暴露辦能引起神經系統(tǒng)的損傷,包括智商降低、聽力及視力的減退和外周神經功能的損害。研究表明,生長發(fā)育期的神經系統(tǒng)對鉛更敏感,即使鉛暴露濃度低于兒童鉛中毒的下限值10μg/dl也能損傷其神經系統(tǒng)。嬰幼兒鋁暴露可引起不可逆的神經系統(tǒng)損害,主要表現(xiàn)為學習記憶能力降低和神經行為異常,并且這種損傷可持續(xù)到成年階段,甚至終生。海馬和皮質是參與學習記憶形成的重要腦區(qū),研究者也已經證實鉛通過作用于海馬來影響學

2、習記憶功能。近些年來,人們對鉛對學習記憶的影響及其細胞和分子學機制做了廣泛的研究。但具體的機制仍然不清楚,故開展其相關機制研究具有重要意義。
   本研究通過母鼠產仔當天開始給予低濃度醋酸鉛水溶液建立發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露模型,研究仔鼠各發(fā)育階段海馬和皮質中的代謝型谷氨酸受體5(mGluR5)和Homer-lb/c蛋白表達及成年期學習記憶能力的改變情況,探討鉛影響學習記憶的機制,為兒童鉛中毒的預防提供新的理論基礎和實驗依據。

3、r>   方法:健康3月齡雌性人鼠30只,按體重隨機分成對照組、低劑量鉛暴露組1、2,每組10只雌鼠。各組大鼠均飼以普通飼料,飲用雙蒸水。適應性喂養(yǎng)1周后雌鼠和正常雄鼠1:1合籠,以次晨發(fā)現(xiàn)陰栓或陰道分泌物鏡檢發(fā)現(xiàn)精子者確定為妊娠0天,并單獨喂養(yǎng)母鼠,自生產第一天低劑量鉛暴露組1、2分別飲用0.05%、0.2%醋酸鉛溶液,直到仔鼠出生后28天(PN28d)。對照組繼續(xù)飲用雙蒸水。鉛暴露組仔鼠斷乳前通過母乳飲用醋酸鉛,斷乳后繼續(xù)飲用相同

4、濃度醋酸鉛。PN7d、PN14d、PN21d、PN28d解剖動物取出腦海馬和大腦皮質,放入液氮中,轉存到-70℃冰箱中;PN28d測腦鉛和血鉛;PN56d進行水迷宮實驗。取出仔鼠海馬和大腦皮質標本,免疫組化、Western blot方法檢測腦海馬、大腦皮質mGluR5和Homer-lb/c蛋白的表達的變化。
   結果:
   1、發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露對大鼠血鉛和腦海馬鉛含量的影響各慢性鉛暴露組仔鼠血鉛和腩海馬鉛含量明

5、顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義。
   2、發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露對大鼠學習記憶能力的影響在水迷宮實驗中,訓練第四天開始,鉛暴露大鼠尋找平臺潛伏期延長,結果表明慢性鉛暴露可明顯損傷仔鼠的空問定位航行能力。
   3、發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露對腦海馬和大腦皮質mGluR5和Homer-1b/c蛋白表達的影響
   (1)免疫組織化學結果顯示:對大鼠腦海馬和皮質進行免疫組織化學實驗,檢測mGluR5的表達。在海馬的CA

6、3區(qū)和DG區(qū)PN7d、PN14d、PN21d和PN28d時各鉛暴露組的積分光密度值與對照組比差異有統(tǒng)計學意義,即鉛暴露組該蛋白的表達含量低于對照組。大腦皮質PN7d時,低劑量1組相對于對照組無統(tǒng)計學差異,低劑量2組與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義,低于對照組;PN14d、PN21d和PN28d時各鉛暴露組相對于對照組均有統(tǒng)計學差異,低于對照組。
   (2)Western blot結果顯示:與對照組相比,發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露對大鼠

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