臟器間質(zhì)樹突狀細(xì)胞在多器官功能障礙綜合征中的變化與作用研究.pdf

1、目的：觀察小鼠肺臟、肝臟與腎臟間質(zhì)樹突狀細(xì)胞的形態(tài)、數(shù)量和分布，了解MODS小鼠肺臟、肝臟與腎臟間質(zhì)樹突狀細(xì)胞病變以及DC功能相關(guān)的細(xì)胞因子、趨化因子及炎癥因子在MODS病程中的變化規(guī)律與意義，探討間質(zhì)DC在免疫紊亂、過度炎癥及臟器損傷機(jī)制中的影響與作用，為MODS免疫學(xué)機(jī)制與防治研究提供新的依據(jù)。 方法：腹腔注射酵母多糖復(fù)制C57BL/6小鼠MODS模型，分為正常對(duì)照、3-6小時(shí)、12-48小時(shí)、5-7日和10-12日組。光鏡

2、與電鏡觀察MODS各期小鼠肺臟、肝臟和腎臟組織病理學(xué)改變，臟器間質(zhì)樹突狀細(xì)胞的形態(tài)、數(shù)量和分布特點(diǎn)及變化規(guī)律。運(yùn)用免疫學(xué)方法檢測(cè)間質(zhì)樹突狀細(xì)胞表面標(biāo)記物CD11c和CD205、共刺激分子CD80、CD86和MHC-Ⅱ類分子的表達(dá)水平及肺臟中IL-1β、IL-10及CGRP的表達(dá)情況。運(yùn)用RT-PCR法檢測(cè)趨化因子SLC及其受體CCR7在肺臟中的表達(dá)變化情況，判定MODS各期肺間質(zhì)樹突狀細(xì)胞的遷移活性。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)MODS各期外周血CD

3、4+T細(xì)胞與CD8+T細(xì)胞的數(shù)量與比值，外周血單個(gè)核細(xì)胞對(duì)MHC-Ⅱ分子表達(dá)的變化。 結(jié)果：間質(zhì)樹突狀細(xì)胞廣泛分布于正常小鼠肺臟、肝臟與腎臟中，數(shù)量極少，約占各臟器總細(xì)胞數(shù)的5-9‰，大部分處于非成熟狀態(tài)，低表達(dá)CD80、CD86與MHC-Ⅱ分子。致傷早期(3-6小時(shí))，各臟器功能與病理改變輕微。間質(zhì)DC顯著增生，對(duì)CD80、CD86和MHC-Ⅱ分子的表達(dá)輕度增加。外周血中MHC-Ⅱ陽性的單個(gè)核細(xì)胞與CD4+T細(xì)胞數(shù)均減少，CD

4、4/8比值下降。趨化因子SLC及其受體CCR7在肺組織中表達(dá)水平均較正常組輕度上升。炎癥因子IL-1β、IL-10和CGRP在肺組織中陽性細(xì)胞數(shù)較正常組顯著升高；急性損傷期(12-48小時(shí))，各臟器出現(xiàn)功能改變，臟器實(shí)質(zhì)細(xì)胞損傷較重。間質(zhì)DC繼續(xù)保持增生狀態(tài)，數(shù)量略低于致傷早期，但CD80、CD86和MHC-Ⅱ分子陽性細(xì)胞數(shù)顯著上升。外周血MHC-Ⅱ陽性的單個(gè)核細(xì)胞及CD4+T細(xì)胞數(shù)顯著減少，CD4/8比值明顯下降。SLC與CCR7在肺

5、組織中表達(dá)明顯高于正常組。促炎因子IL-1β在肺內(nèi)表達(dá)繼續(xù)增多，達(dá)到高峰；緩解期(5-7日)，臟器功能與病理變化明顯減輕。間質(zhì)DC數(shù)量仍高于正常組，但其功能與活性降低并趨于正常水平。外周血MHC-Ⅱ陽性的單個(gè)核細(xì)胞與CD4+T細(xì)胞數(shù)均有增加，CD4/8比值回升。肺組織中SLC繼續(xù)保持上升趨勢(shì)，而CCR7則開始下降。肺臟炎癥因子IL-1β表達(dá)顯著減少，趨于正常；MODS期(10-12日)，各臟器病理改變嚴(yán)重，功能處于衰竭狀態(tài)。間質(zhì)DC再一

6、次高度增生，但其對(duì)CD80、CD86和MHC-Ⅱ表達(dá)顯著下降。外周血MHC-Ⅱ陽性的單個(gè)核細(xì)胞數(shù)下降至最低點(diǎn)，CD4+T細(xì)胞也明顯減少，CD4/8比值顯著下降。肺組織中SLC表達(dá)水平繼續(xù)上升，而CCR7表達(dá)水平明顯下降，低于正常組。肺內(nèi)IL-1β陽性細(xì)胞數(shù)仍處于較低水平，IL-10和CGRP表達(dá)顯著升高，達(dá)到峰值。 結(jié)論：1.觀察并描述了小鼠肺臟、肝臟和腎臟間質(zhì)樹突狀細(xì)胞的含量、分布及形態(tài)特征。2.臟器間質(zhì)樹突狀細(xì)胞在小鼠MOD

7、S模型各時(shí)期中數(shù)量及活性的變化與臟器功能和結(jié)構(gòu)的病理變化存在著密切關(guān)系，臟器間質(zhì)樹突狀細(xì)胞的變化可能影響或參與了MODS病程中的免疫失衡與免疫抑制過程。3.趨化因子SLC及其受體CCR7可能是影響MODS小鼠肺臟間質(zhì)樹突狀細(xì)胞免疫功能的一個(gè)重要因素。CCR7表達(dá)水平可以作為估價(jià)間質(zhì)樹突狀細(xì)胞遷移活性和機(jī)體免疫應(yīng)答水平的一個(gè)指標(biāo)。4.肺間質(zhì)樹突狀細(xì)胞的活性和數(shù)量的變化與促炎因子和抗炎因子表達(dá)的變化在MODS病程中具有密切的相關(guān)性和規(guī)律性，