糖尿病胃輕癱大鼠胃竇PSD95和Synapsin-I的表達(dá)和意義.pdf

1、目的：研究在糖尿病進(jìn)程中突觸后致密蛋白95（PSD95），突觸蛋白-I（Synapsin-I）及其磷酸化狀態(tài)P-Synapsin-I在胃竇的表達(dá)變化和作用，從而探討腸神經(jīng)系統(tǒng)（ENS）的可塑性。
　　
　　 方法：將SD雄性大鼠隨機(jī)分為糖尿病組（n=32）和對(duì)照組（n=12）。在糖尿病造模后第2、4、8及12周各脫頸椎處死糖尿病組大鼠8只，留取大鼠胃竇標(biāo)本。對(duì)照組大鼠分別與同期糖尿病大鼠一起處死，每期各3只，留取標(biāo)本。

2、Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)PSD95和Synapsin-I mRNA表達(dá)：從胃竇組織中提取總RNA，進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR），然后在Step One Real-time PCR system(AB Applied Biosystems）中進(jìn)行熒光定量PCR反應(yīng)。Western Blot檢測(cè)PSD95和P-Synapsin-I蛋白表達(dá)，Qunantity-One圖像分析蛋白的相對(duì)表達(dá)強(qiáng)度。對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

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　　 結(jié)果：對(duì)照組大鼠各期的PSD95和Synapsin-I mRNA表達(dá)無(wú)顯著變化(P>0.05）。DM組大鼠各期PSD95和Synapsin-I mRNA表達(dá)均較對(duì)照組顯著下降(P<0.05)，從第四周開(kāi)始PSD95和Synapsin-I mRNA表達(dá)隨病程進(jìn)展逐漸下降。DM組大鼠各期的PSD95，P-Synapsin-I蛋白表達(dá)均較對(duì)照組顯著下降(P<0.05)，從第四周開(kāi)始隨著糖尿病病程的進(jìn)展表達(dá)逐漸下降(

4、P<0.05)。而對(duì)照組大鼠各期的PSD95和P-Synapsin-I蛋白表達(dá)無(wú)顯著變化（P>0.05）。
　　
　　 結(jié)論：糖尿病胃排空障礙的主要發(fā)病機(jī)制之一是胃腸道腸神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生病變，本課題選取了PSD95和Synapsin-I兩個(gè)在突觸可塑性研究方面具有重要意義的突觸相關(guān)蛋白進(jìn)行研究。糖尿病胃輕癱大鼠胃竇組織中P-synapsin-I的表達(dá)量下降，提示 Synapsin-I在糖尿病胃輕癱ENS病變發(fā)生過(guò)程中，起著