Notch1、c-myc及p21在乳腺癌中的表達及冬凌草甲素對乳腺癌Bcap-37細胞的作用研究.pdf

1、本研究分為二部分，第一部分，目的:探討notch1、c-myc及p21蛋白在乳腺癌組織中的表達情況及其與臨床病理的關(guān)系,分析其在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用,為乳腺癌臨床藥物治療提供理論依據(jù)。
　　 方法:采用免疫組化S-P法檢測notch1、c-myc及p21蛋白在60例乳腺癌組織和18例乳腺良性病變組織中的表達,分析它們的表達情況與患者臨床病理的關(guān)系以及notch1、c-myc和p21蛋白表達的相關(guān)性。
　　 結(jié)果:not

2、ch1、c-myc和p21蛋白在乳腺癌組織中的陽性表達率分別為45.00％(27/60)、60.00％(36/60)和58.33％(35/60),與乳腺良性病變組織的陽性表達率11.11％(2/18)、22.22％(4/18)、27.78％(5/18)相比有非常顯著差異(P<0.01)。其中,notch1蛋白表達強度與乳腺癌的病理分級呈顯著相關(guān)性(P<0.05),與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈非常顯著相關(guān)(P<0.01),與年齡及腫瘤的大小無關(guān)；c-m

3、ye蛋白與乳腺癌病理分級、年齡、腫瘤大小及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無明顯相關(guān)性；p21蛋白與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈顯著負相關(guān)性(P<0.05),與病理分級、年齡及腫瘤大小無關(guān)。notch1與c-myc蛋白在乳腺癌中的表達呈非常顯著的相關(guān)性(P<0.01)。
　　 結(jié)論:notch1、c-myc及p21蛋白在乳腺癌組織中的的陽性表達均高于在乳腺良性病變組織中的表達,提示三者在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮一定的作用。notch1蛋白的表達與乳腺癌病理分級呈顯

4、著的相關(guān)性,與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移亦呈非常顯著相關(guān)性,表明notch1蛋白的表達可能與乳腺癌的惡性程度相關(guān),對乳腺癌患者預(yù)后的判斷有一定的幫助。
　　 第二部分：
　　 目的:觀察冬凌草甲素(Oridonin,Ori)對乳腺癌Bcap-37細胞增殖的抑制作用并探討其機制。
　　 方法:四氮唑藍(methy1 thiazoly1 tetrazolium,MTT)法觀察Ori對乳腺癌Bcap-37細胞增殖的影響；相差顯微鏡、H

5、oechst33258熒光染色觀察Ori作用前后Bcap-37細胞的形態(tài)學(xué)變化；流式細胞儀檢測Ori對Bcap-37細胞周期的影響；RT-PCR檢測Ori作用前后Bcap-37細胞中notch1、c-myc、p21、cdc2及cyclinB1 mRNA表達的變化。
　　 結(jié)果:Ori對乳腺癌Bcap-37細胞的生長增殖有明顯抑制作用,呈濃度和時間依賴性。相差顯微鏡觀察給藥后Bcap-37細胞形態(tài)發(fā)生明顯變形。Hoechst332

6、58熒光染色觀察到給藥后部分細胞出現(xiàn)胞核染色質(zhì)不均,呈顆粒狀熒光等凋亡特征性改變。流式細胞儀檢測顯示給藥后細胞被阻滯在G2/M期,其20μmol/L濃度組變化最明顯。RT-PCR分析顯示,Ori作用后Bcap-37細胞p21mRNA表達水平上調(diào),cyclinB1、cdc2、c-myc及notch1 mRNA表達水平下調(diào)。
　　 結(jié)論:冬凌草甲素可顯著抑制乳腺癌Bcap-37細胞的增殖,誘導(dǎo)Bcap-37細胞發(fā)生G2/M期阻滯、凋