香魚巨噬細胞炎性蛋白-2基因的克隆序列分析及表達.pdf

1、趨化因子（Chemokines）是一種低分子量（8～10 kDa）、通過免疫細胞產生的細胞因子。它能夠趨化白細胞運動，參與免疫及炎癥反應中。根據其特征性的結構可以分為4類，分別是CXC、CC、C和CX3C。巨噬細胞炎性蛋白-2（MIP-2）就是一種典型的CXC型趨化因子，可趨化中性粒細胞到炎癥部位，從而使炎癥反應得以消除。本文從香魚巨噬細胞轉錄組測序中獲得 MIP-2基因，閱讀框序列長為318個核苷酸，其編碼的前體蛋白由105個氨基酸組

2、成、相對分子質量為11.6 kDa。N端19個氨基酸為信號肽序列。氨基酸序列分析表明，香魚 MIP-2和白斑狗魚 MIP-2的同源性最高，達54％。與其它魚類 MIP-2的同源性介于39%～41%之間，與哺乳動物 MIP-2的同源性低于34%。香魚的MIP-2和其它魚類中的MIP-2和 IL8、IL8-like等均含有 CXC的結構區(qū)域。健康香魚 MIP-2基因 mRNA主要在脾、腎、腦、鰓中表達，在肝、心、肌肉、腸中表達量次之。實時熒

3、光定量 PCR結果顯示，鰻利斯頓氏菌侵染香魚后，各組織中 MIP-2基因 mRNA表達量均呈上調趨勢。尤其以腎組織和肌肉組織中變化最顯著，最高值分別為對照組的23和25倍。此后表達量上調趨緩，趨向恢復到對照組表達水平。采用原核表達獲得 MIP-2蛋白，免疫小鼠，制備 M IP-2抗血清，免疫印跡驗證制備抗血清的效價。本文闡述了香魚 MIP-2基因表達與鰻利斯頓氏菌的感染密切相關，揭示了在香魚抗菌免疫反應中，MIP-2可能具有重要的作用。