茜草飲片炮制工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、本課題為國家“十五”科技攻關(guān)項(xiàng)目“茜草飲片炮制工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究”的一部分，主要對茜草的臨床常用飲片規(guī)格茜草、茜草炭的炮制工藝和飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行規(guī)范化研究。內(nèi)容分為五部分：茜草炒炭前后化學(xué)成分的改變；茜草、茜草炭飲片炮制工藝的篩選，中試生產(chǎn)驗(yàn)證了優(yōu)化工藝的可行性；指標(biāo)性成分的含量測定和穩(wěn)定性考察；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）的制定；茜草飲片高效液相指紋圖譜的建立。 在查閱古文獻(xiàn)和現(xiàn)代文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，總結(jié)前人炮制經(jīng)驗(yàn)，寫出“茜草飲片炮制歷史沿革

2、概況”、“茜草炮制研究概況”兩篇綜述。對茜草藥材進(jìn)行資源鑒定，選用藥典規(guī)定的茜草科植物茜草作為本研究所用藥材。以茜草主要有效成分大葉茜草素含量為指標(biāo)，比較了茜草藥材、茜草藥材不同部位以及各地市售飲片大葉茜草素含量，對茜草炒炭前后主要化學(xué)成分的改變進(jìn)行了定性和定量比較，結(jié)果表明炒炭后總蒽醌、大葉茜草素等成分含量降低，同時(shí)產(chǎn)生了新的化學(xué)成分；對茜草炒炭后增加成分進(jìn)行提取、分離、結(jié)構(gòu)鑒定，確定為1，3—二羥基蒽醌，藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí)其具有止血作用，

3、作為茜草炭含量測定的指標(biāo)成分。 以大葉茜素素含量為指標(biāo)，以用水量、軟化時(shí)間、干燥溫度和時(shí)間為因素，采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)選茜草切制工藝；以茜草鞣質(zhì)含量為指標(biāo)，配合藥理止血實(shí)驗(yàn)，以炒炭溫度和時(shí)間為因素，優(yōu)化茜草炭炮制工藝。結(jié)果顯示茜草切制最佳工藝為確定茜草粗根飲片切制工藝為A3B1C3D2、茜草根端飲片切制工藝為A2B1C3D2、茜草細(xì)根飲片切制工藝為A3B1C2D1；優(yōu)選出茜草炭最佳工藝為A281；采購河南、陜西、山東等地茜草藥材，

4、中試生產(chǎn)茜草、茜草炭飲片各13個(gè)批次，驗(yàn)證工藝的可行性。 采用高效液相色譜法，日本島津LC—20AT高效液相色譜儀，Shim—Pack CLC—ODS色譜柱（6．0 mmID*15cm）（日本島津），分別以檢測波長：250nm，檢測溫度：25℃，流動相：甲醇—水—四氫呋喃（310：90：3）為條件對茜草飲片中大葉茜草素含量進(jìn)行測定；以檢測波長：250 nm，檢測溫度：25℃，流動相：乙腈—水（0．6：0．4）為條件對茜草炭飲片1

5、，3—二羥基蒽醌進(jìn)行含量測定，確定最低含量限度指標(biāo)。茜草飲片中大葉茜草素含量以不低于0．40％，茜草炭中1，3—二羥基蒽醌的含量不低于0．15％；采用間接競爭酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對黃曲霉毒素B1的含量及限度考察，含量限度為5μg/kg。分別對中試茜草、茜草炭飲片進(jìn)行0月，1月，2月，3月，6月，12月的穩(wěn)定性考察，暫定茜草飲片的保存年限為1年。 建立茜草、茜草飲片高效液相指紋圖譜，比較茜草飲片與茜草炭飲片指紋圖譜的區(qū)別，

6、采用SHIMADZU LC-20AT高效液相色譜儀；Thermo hypersil gold（4．6×250）高效液相色譜柱，在270 nm檢測波長下，流動相：乙腈-水：0．01～14min（40：60），14～25 min（45：55），25～33 min（50：50），33～38 min（55：45），38～56min（60：40），56～80 min（70：30），80～90 min（95：5）為梯度洗脫。通過指紋圖譜處理軟件Ch

7、romafinger2005 beta0．1軟件對茜草指紋圖譜進(jìn)行相似度分析，得出茜草飲片指紋圖譜相似度不低于0．9，茜草炭飲片相似度不低于0．8，表明茜草飲片指紋圖譜變化不大。 本研究首次對茜草飲片中大葉茜草素的含量進(jìn)行了研究，規(guī)定最低含量限度，對茜草炒炭前后化學(xué)成分進(jìn)行了定性和定量的比較；首次對炒炭后增加化學(xué)成分進(jìn)行提取、分離、結(jié)構(gòu)鑒定，確定其為1，3-二羥基蒽醌，建立其含量測定方法，作為茜草炭含量指標(biāo)性成分，為制定茜草飲片